河北哪里有子宮內(nèi)膜異位癥模型造模方法

子宮內(nèi)膜異位癥模型是通過將子宮組織移植到腸系膜上而誘發(fā)的。簡言之，供體動物（發(fā)情期）經(jīng)宮頸脫位處死，取出兩側(cè)子宮角并置于溫箱中。將子宮角縱向打開，切成約 4 平方毫米（2 毫米*2 毫米）的正方形小塊，然后移植到發(fā)情期受體小鼠的腹壁上來構(gòu)建子宮內(nèi)膜異位癥模型。動物模型總體可以分為兩類，一是自發(fā)性動物模型，即不需干預(yù)就可自發(fā)形成類似人類EM的病灶;二是誘發(fā)性動物模型，即通過各種方法將內(nèi)膜組織或細(xì)胞移植于動物體內(nèi)，形成EM病灶。子宮內(nèi)膜異位癥模型是研究該疾病發(fā)病機理的重要工具。河北哪里有子宮內(nèi)膜異位癥模型造模方法

將人子宮內(nèi)膜碎片經(jīng)腹腔注入SCID小鼠體內(nèi)以建立SCID小鼠子宮內(nèi)膜異位癥(EMT)模型,并觀察其成模情況。方法 取56~62日齡CB-17 SCID雌性小鼠18只,體質(zhì)量17~25 g,腹部常規(guī)消毒后用16號針頭于小鼠下腹正中行腹腔穿刺,注入含子宮內(nèi)膜碎片的磷酸緩沖液(PBS) 0.2 mL,含內(nèi)膜碎片8~10塊。種植第2日給予30 mg/kg體質(zhì)量的苯甲酸雌二醇于小鼠腿部肌肉注射,以利于子宮內(nèi)膜生長種植。結(jié)果 造模4周后見小鼠形態(tài)消瘦,部分呈病態(tài),行手術(shù)打開腹腔見散在不典型內(nèi)異病灶,取病灶檢測未見典型的子宮內(nèi)膜異位癥病理學(xué)變化。內(nèi)蒙古專業(yè)的子宮內(nèi)膜異位癥模型動物實驗外包研究人員正在利用子宮內(nèi)膜異位癥模型探索疾病的微生態(tài)失衡問題。

子宮內(nèi)膜異位癥( endometriosis,EM)是子宮內(nèi) 膜腺體和間質(zhì)種植于子宮以外的一種慢性、 依賴性疾病, 在育齡期女性中發(fā)病率為 10% ~ 15%  。EM 雖是一種良性疾病,卻具有發(fā)病范圍廣、癥狀多樣、易轉(zhuǎn)移、易復(fù)發(fā)的惡性行為,至今其 病因及發(fā)病機制仍不清楚。目前 EM 的改善手段主 要包括手術(shù)和藥物,但療效均不理想。因此,子宮內(nèi)膜異位癥是婦科學(xué)研究的熱點和難點之一。然而,目前 EM 盆腔纖維化的形 成機制尚不清楚。構(gòu)建一種高效的子宮內(nèi)膜異位癥動物模型將 有助于對本病發(fā)病機制的認(rèn)識和新藥的開發(fā), 同時 可以為探索子宮內(nèi)膜異位癥纖維化發(fā)病機制提供理想模型。

子宮內(nèi)膜異位癥自然發(fā)生的前提是有月經(jīng)周期，非人靈長類動物可用于自發(fā)性模型的建立，其與人類疾病的發(fā)生位點相同，且形態(tài)學(xué)與人類相應(yīng)部位的相同，以前人們認(rèn)為自發(fā)模型很少在卵巢形成EM，因此與人類EM的發(fā)生可能存在差異，但Dick[町等的研究改變了這一理論，證實卵巢也易發(fā)病。而誘發(fā)性模型(除非人靈長類動物)不能完全模擬人類發(fā)生EM的過程、環(huán)境。因此，非人靈長類動物是比較好的模型，但其發(fā)病率低，約25%-35'3毛;周期在10年以上;且來源、少，所需經(jīng)費昂貴。而誘發(fā)性模型成功率為759串-959島，實驗周期為2個月左右，來源普遍，價格較低，適合大樣本研究。子宮內(nèi)膜異位癥模型的建立需要跨學(xué)科的合作和交流。

子宮內(nèi)膜異位癥模型的觀察指標(biāo)驗證模型是否成功：大鼠建模28d后再次手術(shù)，腹腔麻醉后固定，腹部備皮，消毒鋪巾，取原切口旁開腹，取出3個不同部位的移植物。記錄移植物大體特點。用游標(biāo)卡尺測量移植物的長度、高度與寬度，按公式計算體積：體積=0.52×長×寬×高[4]。用電子天平稱取移植物質(zhì)量。將取出的移植物和左側(cè)子宮的在位內(nèi)膜標(biāo)本用10%多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，H-E染色，顯微鏡下觀察組織病理學(xué)變化來驗證模型的成功率。研究人員正在利用子宮內(nèi)膜異位癥模型探索新的改善手段。四川專業(yè)的子宮內(nèi)膜異位癥模型如何構(gòu)建

通過子宮內(nèi)膜異位癥模型，我們可以研究疾病與環(huán)境因素的相互作用。河北哪里有子宮內(nèi)膜異位癥模型造模方法

子宮內(nèi)膜異位癥模型造模方法選用非動情期大鼠，術(shù)前1 d予戊酸雌二醇0.2 mg/只灌服。手術(shù)在室溫28～32℃環(huán)境下進(jìn)行，無菌操作。以10%水合氯醛3 mL/kg進(jìn)行腹腔注射麻醉，將麻醉后的大鼠仰臥位固定于手術(shù)板上，腹部備皮，常規(guī)消毒鋪巾。大鼠下腹正中恥骨聯(lián)合上1 cm處以上取長約2～3 cm縱行切口，進(jìn)腹后在膀胱背側(cè)找到“Y”字型子宮，游離右側(cè)子宮，近端離子宮角1 cm處結(jié)扎，遠(yuǎn)端離卵巢1 cm處結(jié)扎，剪下右側(cè)子宮。將剪下的子宮組織放入盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中，縱向剖開。將子宮內(nèi)膜與肌層分離，剪取3塊3 mm×5 mm的內(nèi)膜組織，用4-0號可吸收線將內(nèi)膜面貼于種植部位，分別縫合在左側(cè)卵巢、宮骶韌帶以及左側(cè)遠(yuǎn)離腹部切口的腹壁上。隨后用慶大霉素稀釋液沖洗腹腔，***用0號絲線分層縫合腹部切口，常規(guī)關(guān)腹。術(shù)后密切觀察大鼠呼吸、心率，待其自然蘇醒，正常喂養(yǎng)，觀察大鼠傷口及生活情況。術(shù)后第1天開始每只大鼠肌內(nèi)注射慶大霉素0.1 mL，每天1次，連續(xù)7 d。術(shù)后第10天開始每天予戊酸雌二醇0.02 mg/kg灌服,連續(xù)5 d。河北哪里有子宮內(nèi)膜異位癥模型造模方法