HE染色細胞漿染色原理:細胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當pH調(diào)到6.7-6.8時,大于蛋白質(zhì)的等電點pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明的對比。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。天津?qū)I(yè)的HE染色哪家好

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學(xué)染色法,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗過程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。2、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來水洗,分化液分化,自來水洗,返藍液返藍,流水沖洗。3、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。結(jié)果判讀:細胞核呈藍色,細胞質(zhì)呈紅色內(nèi)蒙古推薦的HE染色哪家好HE染色中固定液如何配置。

HE染色不管怎么操作,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定;對于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,然后自來水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補充染色媒介,增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結(jié)晶和黑色光滑的細胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。冰凍切片是否可以做HE染色?

HE染色在組織損傷與修復(fù)中的應(yīng)用。在組織損傷與修復(fù)的研究中,HE染色同樣具有廣泛應(yīng)用。通過對損傷組織切片進行HE染色,研究人員可以觀察到細胞在損傷后的變化過程,例如,細胞腫脹、壞死、凋亡等現(xiàn)象,以及修復(fù)過程中組織的再生情況。在一些慢性損傷的模型中,HE染色能幫助觀察到纖維化過程,顯示出膠原蛋白的沉積和組織的硬化。通過定期取樣和染色分析,研究人員能夠追蹤組織修復(fù)的動態(tài)過程,進一步探討促進修復(fù)和抑制損傷的相關(guān)機制。比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。河北靠譜的HE染色檢測
HE染色觀察細胞形態(tài)變化。天津?qū)I(yè)的HE染色哪家好
HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍色時應(yīng)及時更換新液。 3.染色的時間長短需依據(jù):染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4.分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關(guān)鍵,若分化失當則必然引起染色不勻或過淡,過深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復(fù)染后,組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現(xiàn)象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復(fù)染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。 天津?qū)I(yè)的HE染色哪家好