熒光染料法原理:一些熒光染料(如 SYBR Green I)能特異性地結(jié)合到雙鏈 DNA 上。在 PCR 反應(yīng)體系中,隨著 DNA 擴(kuò)增產(chǎn)物的不斷增加,與雙鏈 DNA 結(jié)合的熒光染料也越來(lái)越多,熒光信號(hào)強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關(guān)。通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化,就可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè) PCR 反應(yīng)的進(jìn)程。過(guò)程:在 PCR 反應(yīng)的每一個(gè)循環(huán)中,當(dāng)溫度降低到退火溫度時(shí),引物與模板結(jié)合,DNA 聚合酶開(kāi)始延伸引物,合成新的 DNA 鏈。此時(shí),熒光染料會(huì)結(jié)合到新合成的雙鏈 DNA 上,儀器會(huì)在特定的時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度。隨著循環(huán)次數(shù)的增加,熒光信號(hào)逐漸增強(qiáng),當(dāng)信號(hào)強(qiáng)度達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí),對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù)被稱(chēng)...
杭州柏恒(Bioer)Q9600Pro熒光定量PCR儀是一款備受科研人員青睞的高性能實(shí)驗(yàn)設(shè)備。其出色的熒光信號(hào)強(qiáng)度、低背景噪聲和高靈敏度,使其在分子生物學(xué)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、基因型鑒定、病毒載量測(cè)定等研究領(lǐng)域,為科研工作者提供了一個(gè)強(qiáng)有力的實(shí)驗(yàn)工具。首先,Q9600Pro熒光定量PCR儀具有出色的熒光信號(hào)強(qiáng)度。通過(guò)精心設(shè)計(jì)的熒光探針和熒光檢測(cè)系統(tǒng),該儀器能夠準(zhǔn)確捕獲PCR擴(kuò)增過(guò)程中產(chǎn)生的熒光信號(hào),并將其轉(zhuǎn)化為可靠的定量數(shù)據(jù)。強(qiáng)大的熒光信號(hào)帶來(lái)了更高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性,使用戶(hù)能夠?qū)ξ⒘磕繕?biāo)物質(zhì)進(jìn)行快速、穩(wěn)定的定量分析。其次,Q9600Pro熒光定量PCR儀背景噪聲極低。低...
核酸測(cè)序:在一些測(cè)序技術(shù)中,如熒光標(biāo)記的引物測(cè)序法,VIC 熒光染料可標(biāo)記在引物或測(cè)序反應(yīng)的終止子上。在測(cè)序過(guò)程中,不同堿基對(duì)應(yīng)的熒光標(biāo)記會(huì)發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光信號(hào),通過(guò)檢測(cè)這些信號(hào)來(lái)確定 DNA 序列。VIC 熒光染料的使用有助于提高測(cè)序的準(zhǔn)確性和分辨率,尤其在多重測(cè)序或高通量測(cè)序平臺(tái)中,與其他熒光染料配合使用,可實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)樣本或多個(gè)基因區(qū)域的同時(shí)測(cè)序。分子信標(biāo)技術(shù):分子信標(biāo)是一種用于檢測(cè)核酸的發(fā)夾狀熒光探針,VIC 熒光染料可標(biāo)記在分子信標(biāo)的莖環(huán)結(jié)構(gòu)上。當(dāng)分子信標(biāo)與目標(biāo)核酸互補(bǔ)結(jié)合時(shí),其莖環(huán)結(jié)構(gòu)打開(kāi),熒光染料與淬滅基團(tuán)分離,從而發(fā)出熒光信號(hào)。利用 VIC 熒光染料的這種特性,可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核...
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于多個(gè)行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):醫(yī)療診斷行業(yè)傳染病檢測(cè):可對(duì)多種傳染病病原體進(jìn)行檢測(cè)和定量分析,如、乙肝病毒、丙肝病毒、病毒等,幫助醫(yī)生及時(shí)準(zhǔn)確地診斷疾病,監(jiān)測(cè)病情發(fā)展,以及評(píng)估效果。遺傳病診斷:通過(guò)檢測(cè)特定基因的突變或拷貝數(shù)變化,診斷遺傳性疾病,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等,為遺傳咨詢(xún)和產(chǎn)前診斷提供依據(jù)。診斷與監(jiān)測(cè):一方面,可檢測(cè)相關(guān)基因的突變、甲基化狀態(tài)或基因表達(dá)水平的變化,輔助的早期診斷和預(yù)后評(píng)估;另一方面,在過(guò)程中,通過(guò)監(jiān)測(cè)腫瘤細(xì)胞中特定基因的變化,評(píng)估效果,及時(shí)發(fā)現(xiàn)的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。若核酸發(fā)生降解,會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增片...
杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9600Pro作為一款**PCR儀器,其配備了一塊,這一設(shè)計(jì)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)控運(yùn)行狀態(tài),用戶(hù)可以直觀地了解PCR實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展情況,保證實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。,為用戶(hù)提供了更為清晰、直觀的實(shí)驗(yàn)信息展示界面。在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,用戶(hù)可以通過(guò)顯示屏實(shí)時(shí)監(jiān)控儀器的運(yùn)行狀態(tài)、反應(yīng)曲線、溫度曲線等關(guān)鍵數(shù)據(jù),了解實(shí)驗(yàn)進(jìn)展情況,及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常情況并采取相應(yīng)措施。這種即時(shí)的反饋和監(jiān)控功能,有助于用戶(hù)提前發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)中可能存在的問(wèn)題,減少實(shí)驗(yàn)失敗的可能性,保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。另外,,使得操作更加便捷、直觀。用戶(hù)可以通過(guò)觸摸屏或按...
熒光定量 PCR 儀的檢測(cè)結(jié)果會(huì)受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面,以下是具體介紹:樣本處理因素樣本采集:樣本采集的部位、時(shí)間和方法不當(dāng)都可能影響檢測(cè)結(jié)果。例如,采集的樣本量不足、未采集到病變部位的細(xì)胞,或者樣本被污染,都可能導(dǎo)致檢測(cè)到的目標(biāo)核酸含量不準(zhǔn)確,出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。核酸提?。汉怂崽崛〉馁|(zhì)量和效率直接關(guān)系到后續(xù)檢測(cè)。提取過(guò)程中若核酸被降解,會(huì)使模板量減少,導(dǎo)致定量結(jié)果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì),也會(huì)抑制 PCR 反應(yīng),影響擴(kuò)增效果和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。TET 熒光染料常被用于熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn),它可以與其他熒光染料如 F...
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀在多個(gè)領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域:作物遺傳育種:在作物遺傳改良中,可用于篩選優(yōu)良基因、鑒定雜種優(yōu)勢(shì)以及檢測(cè)轉(zhuǎn)基因作物中外源基因的整合和表達(dá)情況。例如,通過(guò)檢測(cè)與作物抗逆性、產(chǎn)量等相關(guān)基因的表達(dá)水平,篩選出具有優(yōu)良性狀的品種,加快育種進(jìn)程。植物病害檢測(cè):快速檢測(cè)植物病原體,如病毒、、細(xì)菌等,及時(shí)發(fā)現(xiàn)植物病害,采取相應(yīng)的防治措施,保障農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量。例如,檢測(cè)果樹(shù)中的病毒情況,為果樹(shù)的病蟲(chóng)害防治提供依據(jù)。在多重 PCR 反應(yīng)中對(duì)不同的目標(biāo)序列進(jìn)行特異性標(biāo)記和檢測(cè)。TET熒光定量PCR儀有哪些 杭州柏恒(Bioer)Q9600Pro熒光定量PC...
杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9600Pro采用LED光源設(shè)計(jì),這一設(shè)計(jì)不僅實(shí)現(xiàn)了節(jié)能環(huán)保,也提高了設(shè)備的穩(wěn)定性和使用壽命。LED光源作為一種高效節(jié)能的照明技術(shù),不僅減少了能源的消耗,還減少了對(duì)環(huán)境的污染,符合現(xiàn)代社會(huì)對(duì)可持續(xù)發(fā)展的要求。LED光源的節(jié)能優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在多個(gè)方面。首先,LED光源在發(fā)光過(guò)程中幾乎不會(huì)產(chǎn)生熱量,相比傳統(tǒng)的白熾燈泡或熒光燈管,LED的能源利用率更高,能夠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中***降低能源消耗。其次,LED光源的發(fā)光原理與傳統(tǒng)燈泡不同,LED是通過(guò)半導(dǎo)體發(fā)光,不需要加熱絲或熒光粉等材料,因此功耗更低,使用壽命更長(zhǎng),無(wú)需頻繁更換燈管,省去了不必要的維護(hù)費(fèi)用。此外,LED光源的...
FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號(hào),而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產(chǎn)率,在被特定波長(zhǎng)的光激發(fā)后會(huì)發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光,其激發(fā)波長(zhǎng)通常在495nm左右,發(fā)射波長(zhǎng)在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應(yīng)用于熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中,作為報(bào)告分子來(lái)對(duì)目標(biāo)DNA或RNA進(jìn)行定量檢測(cè)。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進(jìn)行檢測(cè),例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測(cè)其發(fā)射熒光的光學(xué)系統(tǒng)。以QuantStud...
VIC與 FAM 類(lèi)似,是一種熒光報(bào)告基團(tuán),可標(biāo)記在引物或探針上用于熒光定量 PCR。它在 PCR 過(guò)程中,隨著引物或探針與目標(biāo) DNA 的結(jié)合以及 PCR 產(chǎn)物的擴(kuò)增,會(huì)發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光,其熒光信號(hào)強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的量成正比,通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo) DNA 的定量分析。特點(diǎn):激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)與 FAM 有所不同,激發(fā)波長(zhǎng)約為 538nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 554nm,熒光顏色為黃綠色。VIC 常用于多重?zé)晒舛?PCR 中,可與 FAM 等其他熒光染料同時(shí)使用,實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)不同目標(biāo)基因的同時(shí)檢測(cè),因?yàn)槠涔庾V特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號(hào)之間的相互干擾。如 FAM、...
以下是一些判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準(zhǔn)的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個(gè)峰,而樣品和實(shí)驗(yàn)條件均無(wú)變化時(shí),可能是光路系統(tǒng)對(duì)熒光信號(hào)的檢測(cè)精度下降,導(dǎo)致熔解曲線的分析結(jié)果不準(zhǔn)確,此時(shí)需要考慮對(duì)光路系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預(yù)期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設(shè)計(jì)、反應(yīng)條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測(cè)存在誤差,影響了對(duì) DNA 雙鏈解鏈過(guò)程的準(zhǔn)確監(jiān)測(cè),需要對(duì)光路進(jìn)行檢查和校準(zhǔn)。能夠準(zhǔn)確地識(shí)別出微弱的熒光信號(hào)變化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)低水平核酸表達(dá)的檢測(cè)。南通QPCR熒光定量PCR儀品牌排行光學(xué)系統(tǒng):包括光源、激發(fā)...
熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:基礎(chǔ)科研基因表達(dá)分析:研究特定基因在不同組織、細(xì)胞以及不同生理狀態(tài)或處理?xiàng)l件下的表達(dá)水平,有助于深入理解基因的功能和調(diào)控機(jī)制。基因功能研究:通過(guò)定量分析基因表達(dá)的變化,探討基因在細(xì)胞增殖、分化、凋亡等過(guò)程中的作用,以及基因之間的相互調(diào)控關(guān)系。農(nóng)業(yè)研究:作物遺傳改良:檢測(cè)植物基因組中的突變和表達(dá)量變化,評(píng)估作物的生長(zhǎng)發(fā)育情況和適應(yīng)性,為作物品種選育和遺傳改良提供依據(jù)。植物病蟲(chóng)害檢測(cè):快速檢測(cè)植物病原體,如病毒、細(xì)菌、等,有助于及時(shí)采取防治措施,保障農(nóng)作物產(chǎn)量和質(zhì)量。具備多個(gè)熒光檢測(cè)通道,可同時(shí)檢測(cè)多種熒光染料;泰州SYBR-Green熒光定量PCR儀哪個(gè)好FAM并不...
杭州柏恒(Bioer)是一家專(zhuān)注于生物醫(yī)藥領(lǐng)域的科研設(shè)備制造商,其推出的熒光定量PCR儀被***應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中。杭州柏恒熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高精度、高通量和操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),在基因表達(dá)分析、基因型分析、病毒載量檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。首先,杭州柏恒熒光定量PCR儀采用熒光探針技術(shù),能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)靶基因的快速、精細(xì)定量。用戶(hù)可以選擇適當(dāng)?shù)奶结樈M合,結(jié)合PCR擴(kuò)增反應(yīng),實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的高靈敏檢測(cè)。儀器還具有多通道同時(shí)檢測(cè)功能,可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)基因的定量分析,**提高了實(shí)驗(yàn)效率和通量。其次,杭州柏恒熒光定量PCR儀具有高度自動(dòng)化的特點(diǎn),可以通過(guò)預(yù)設(shè)程序自動(dòng)完成PCR擴(kuò)增反...
基因表達(dá)分析:可以精確測(cè)定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達(dá)水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機(jī)制。例如,研究胚胎發(fā)育過(guò)程中某些關(guān)鍵基因的表達(dá)變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制?;蚍中停簩?duì)單核苷酸多態(tài)性(SNP)等基因變異進(jìn)行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進(jìn)化分析等。例如,通過(guò)檢測(cè)個(gè)體在特定基因位點(diǎn)上的 SNP 類(lèi)型,預(yù)測(cè)其對(duì)某些藥物的反應(yīng),實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥。微生物研究:用于對(duì)環(huán)境中的微生物進(jìn)行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類(lèi)和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護(hù)和生態(tài)研究提供依據(jù)。...
FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號(hào),而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產(chǎn)率,在被特定波長(zhǎng)的光激發(fā)后會(huì)發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光,其激發(fā)波長(zhǎng)通常在495nm左右,發(fā)射波長(zhǎng)在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應(yīng)用于熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中,作為報(bào)告分子來(lái)對(duì)目標(biāo)DNA或RNA進(jìn)行定量檢測(cè)。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進(jìn)行檢測(cè),例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測(cè)其發(fā)射熒光的光學(xué)系統(tǒng)。以QuantStud...
基因表達(dá)分析:可以精確測(cè)定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達(dá)水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機(jī)制。例如,研究胚胎發(fā)育過(guò)程中某些關(guān)鍵基因的表達(dá)變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制。基因分型:對(duì)單核苷酸多態(tài)性(SNP)等基因變異進(jìn)行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進(jìn)化分析等。例如,通過(guò)檢測(cè)個(gè)體在特定基因位點(diǎn)上的 SNP 類(lèi)型,預(yù)測(cè)其對(duì)某些藥物的反應(yīng),實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥。微生物研究:用于對(duì)環(huán)境中的微生物進(jìn)行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類(lèi)和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護(hù)和生態(tài)研究提供依據(jù)。...
熒光定量 PCR 儀是一種精密的儀器,正確的維護(hù)和保養(yǎng)可以延長(zhǎng)其使用壽命,保證儀器的性能和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。定期維護(hù):光路系統(tǒng)校準(zhǔn):根據(jù)儀器的使用頻率和廠家建議,定期對(duì)光路系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn),以確保熒光信號(hào)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。校準(zhǔn)過(guò)程通常需要使用標(biāo)準(zhǔn)熒光樣品和專(zhuān)業(yè)的校準(zhǔn)工具,由專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行操作。溫度校準(zhǔn):熒光定量 PCR 儀的溫度準(zhǔn)確性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。定期使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)或溫度校準(zhǔn)設(shè)備對(duì)反應(yīng)模塊的溫度進(jìn)行校準(zhǔn),確保各個(gè)孔位的溫度均勻性和準(zhǔn)確性符合要求。一般建議每 3 - 6 個(gè)月進(jìn)行一次溫度校準(zhǔn)。更換耗材和部件:根據(jù)儀器的使用情況,定期更換易損耗材,如反應(yīng)板、密封墊、移液器吸頭等。對(duì)于一些關(guān)鍵部件,...
ROX原理:主要用于熒光定量 PCR 中的校正和歸一化。在反應(yīng)體系中,ROX 的熒光強(qiáng)度相對(duì)穩(wěn)定,不受 PCR 反應(yīng)過(guò)程的影響。通過(guò)檢測(cè) ROX 的熒光信號(hào),可以對(duì)其他熒光染料的信號(hào)進(jìn)行校正,消除由于加樣誤差、反應(yīng)體積差異、儀器波動(dòng)等因素引起的熒光信號(hào)變化,提高定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。特點(diǎn):激發(fā)波長(zhǎng)約為 570nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 590nm,熒光顏色為紅色。ROX 通常與其他熒光染料如 FAM、VIC 等配合使用,在多重?zé)晒舛?PCR 中,為每個(gè)反應(yīng)孔提供一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)參熒光信號(hào),以便對(duì)不同孔之間的熒光信號(hào)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。對(duì)于一些隱性遺傳疾病,熒光定量 PCR 儀可用于檢測(cè)個(gè)體是否為致病基因...
杭州柏恒(Bioer)是一家專(zhuān)注于生物醫(yī)藥領(lǐng)域的科研設(shè)備制造商,其推出的熒光定量PCR儀被***應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中。杭州柏恒熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高精度、高通量和操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),在基因表達(dá)分析、基因型分析、病毒載量檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。首先,杭州柏恒熒光定量PCR儀采用熒光探針技術(shù),能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)靶基因的快速、精細(xì)定量。用戶(hù)可以選擇適當(dāng)?shù)奶结樈M合,結(jié)合PCR擴(kuò)增反應(yīng),實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的高靈敏檢測(cè)。儀器還具有多通道同時(shí)檢測(cè)功能,可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)基因的定量分析,**提高了實(shí)驗(yàn)效率和通量。其次,杭州柏恒熒光定量PCR儀具有高度自動(dòng)化的特點(diǎn),可以通過(guò)預(yù)設(shè)程序自動(dòng)完成PCR擴(kuò)增反...
基因表達(dá)分析:可以精確測(cè)定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達(dá)水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機(jī)制。例如,研究胚胎發(fā)育過(guò)程中某些關(guān)鍵基因的表達(dá)變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制。基因分型:對(duì)單核苷酸多態(tài)性(SNP)等基因變異進(jìn)行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進(jìn)化分析等。例如,通過(guò)檢測(cè)個(gè)體在特定基因位點(diǎn)上的 SNP 類(lèi)型,預(yù)測(cè)其對(duì)某些藥物的反應(yīng),實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥。微生物研究:用于對(duì)環(huán)境中的微生物進(jìn)行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類(lèi)和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護(hù)和生態(tài)研究提供依據(jù)。...
基因表達(dá)分析:可以精確測(cè)定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達(dá)水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機(jī)制。例如,研究胚胎發(fā)育過(guò)程中某些關(guān)鍵基因的表達(dá)變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制。基因分型:對(duì)單核苷酸多態(tài)性(SNP)等基因變異進(jìn)行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進(jìn)化分析等。例如,通過(guò)檢測(cè)個(gè)體在特定基因位點(diǎn)上的 SNP 類(lèi)型,預(yù)測(cè)其對(duì)某些藥物的反應(yīng),實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥。微生物研究:用于對(duì)環(huán)境中的微生物進(jìn)行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類(lèi)和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護(hù)和生態(tài)研究提供依據(jù)。...
熒光標(biāo)記探針?lè)ㄔ恚菏褂靡环N特異性的熒光標(biāo)記探針,它能與目標(biāo) DNA 序列雜交。探針的 5' 端標(biāo)記有熒光報(bào)告基團(tuán),3' 端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)。在游離狀態(tài)下,報(bào)告基團(tuán)發(fā)出的熒光會(huì)被淬滅基團(tuán)吸收,無(wú)法檢測(cè)到熒光信號(hào)。當(dāng) PCR 反應(yīng)進(jìn)行時(shí),DNA 聚合酶在延伸引物的過(guò)程中,會(huì)將探針?biāo)?,使?bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,報(bào)告基團(tuán)發(fā)出的熒光信號(hào)就可以被儀器檢測(cè)到。每擴(kuò)增一條 DNA 鏈,就會(huì)有一個(gè)探針被水解,釋放出一個(gè)熒光信號(hào),熒光信號(hào)的強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量成正比。過(guò)程:在 PCR 反應(yīng)的退火階段,熒光標(biāo)記探針會(huì)與目標(biāo) DNA 序列特異性結(jié)合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性...
試劑兼容性:選擇與常用試劑品牌兼容性好的儀器,避免因試劑與儀器不匹配而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定或無(wú)法進(jìn)行。一些儀器廠家會(huì)提供配套的試劑,以保證實(shí)驗(yàn)的比較好效果,如羅氏的熒光定量 PCR 儀與羅氏的 TaqMan 試劑配合使用,能發(fā)揮良好的性能。軟件功能:功能強(qiáng)大的軟件應(yīng)具備實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)、數(shù)據(jù)分析、結(jié)果可視化等功能,并且操作界面友好,易于上手。例如,儀器軟件能夠自動(dòng)進(jìn)行基線校正、閾值設(shè)定,還能進(jìn)行基因表達(dá)差異分析、SNP 分型結(jié)果分析等。售后服務(wù):考慮儀器制造商的售后服務(wù)質(zhì)量,包括技術(shù)支持、維修保養(yǎng)、培訓(xùn)服務(wù)等。良好的售后服務(wù)可以幫助用戶(hù)解決在使用過(guò)程中遇到的問(wèn)題,確保儀器的正常運(yùn)行。使熒光信號(hào)能夠更準(zhǔn)確...
SYBR Green I是一種雙鏈 DNA 結(jié)合染料,它能非特異性地嵌入雙鏈 DNA 的小溝中。在游離狀態(tài)下,SYBR Green I 發(fā)出微弱的熒光,但當(dāng)它與雙鏈 DNA 結(jié)合后,熒光信號(hào)會(huì)明顯增強(qiáng)。在熒光定量 PCR 反應(yīng)中,隨著 PCR 產(chǎn)物的不斷合成,SYBR Green I 與雙鏈 DNA 結(jié)合,熒光信號(hào)強(qiáng)度不斷增加,通過(guò)檢測(cè)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)反映 PCR 產(chǎn)物的量,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)起始模板的定量分析。特點(diǎn):能與所有雙鏈 DNA 結(jié)合,不依賴(lài)于特定的序列,因此可用于各種 DNA 模板的定量分析,通用性強(qiáng)。其激發(fā)波長(zhǎng)約為 497nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 520nm,熒光顏色為綠色。但由于它非特異性結(jié)...
VIC與 FAM 類(lèi)似,是一種熒光報(bào)告基團(tuán),可標(biāo)記在引物或探針上用于熒光定量 PCR。它在 PCR 過(guò)程中,隨著引物或探針與目標(biāo) DNA 的結(jié)合以及 PCR 產(chǎn)物的擴(kuò)增,會(huì)發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光,其熒光信號(hào)強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的量成正比,通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo) DNA 的定量分析。特點(diǎn):激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)與 FAM 有所不同,激發(fā)波長(zhǎng)約為 538nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 554nm,熒光顏色為黃綠色。VIC 常用于多重?zé)晒舛?PCR 中,可與 FAM 等其他熒光染料同時(shí)使用,實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)不同目標(biāo)基因的同時(shí)檢測(cè),因?yàn)槠涔庾V特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號(hào)之間的相互干擾。在多重 PC...
熒光定量 PCR 儀是一種通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對(duì) PCR 產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程的儀器。儀器特點(diǎn):高靈敏度和特異性:能檢測(cè)極低拷貝數(shù)的核酸模板,對(duì)目標(biāo)序列具有高度特異性,可減少假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。準(zhǔn)確 quantification:通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào),實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸模板的準(zhǔn)確定量,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。高 throughput:可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品,大幅提高檢測(cè)效率,節(jié)省時(shí)間和成本。高度自動(dòng)化:具備自動(dòng)進(jìn)樣、反應(yīng)程序設(shè)置、數(shù)據(jù)采集和分析等功能,操作簡(jiǎn)便,減少人為誤差。與核酸結(jié)合特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好的染料,可減少非特異性信號(hào)干擾。常州HEX熒光定量PCR儀功能熒光定量 PCR 儀應(yīng)...
選擇適合自己的熒光定量 PCR 儀,需要綜合考慮多個(gè)因素,實(shí)驗(yàn)類(lèi)型:如果是進(jìn)行常規(guī)的基因表達(dá)分析、病原體定量檢測(cè),普通的單通道或多通道熒光定量 PCR 儀即可滿(mǎn)足需求。例如,賽默飛世爾的 QuantStudio 3,適用于基礎(chǔ)的基因表達(dá)和病原體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。若是涉及到復(fù)雜的多重 PCR 實(shí)驗(yàn)、SNP 基因分型,則需要選擇具有更多熒光通道、更高分辨率的儀器,如羅氏的 LightCycler 480,可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)熒光信號(hào),適用于多重分析。通量要求:根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣本數(shù)量來(lái)選擇。對(duì)于樣本量較少的實(shí)驗(yàn),如小型實(shí)驗(yàn)室的科研項(xiàng)目或臨床診斷的少量樣本檢測(cè),96 孔板的熒光定量 PCR 儀就足夠,如伯樂(lè)的 CFX96...
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于多個(gè)行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):生命科學(xué)研究行業(yè)基因表達(dá)分析:是研究基因表達(dá)調(diào)控的重要工具,可精確測(cè)定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理病理?xiàng)l件下基因的表達(dá)水平,有助于深入了解基因的功能和生物過(guò)程的分子機(jī)制?;蚬δ苎芯浚和ㄟ^(guò)對(duì)基因敲除、過(guò)表達(dá)或 RNA 干擾等模型中相關(guān)基因表達(dá)量的定量分析,驗(yàn)證基因的功能,揭示基因之間的相互作用關(guān)系。分子進(jìn)化研究:分析不同物種或同一物種不同個(gè)體之間基因TET 熒光染料常被用于熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn),它可以與其他熒光染料如 FAM、VIC 等一起;揚(yáng)州EVA-Green熒光定量PCR儀功能...
試劑兼容性:選擇與常用試劑品牌兼容性好的儀器,避免因試劑與儀器不匹配而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定或無(wú)法進(jìn)行。一些儀器廠家會(huì)提供配套的試劑,以保證實(shí)驗(yàn)的比較好效果,如羅氏的熒光定量 PCR 儀與羅氏的 TaqMan 試劑配合使用,能發(fā)揮良好的性能。軟件功能:功能強(qiáng)大的軟件應(yīng)具備實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)、數(shù)據(jù)分析、結(jié)果可視化等功能,并且操作界面友好,易于上手。例如,儀器軟件能夠自動(dòng)進(jìn)行基線校正、閾值設(shè)定,還能進(jìn)行基因表達(dá)差異分析、SNP 分型結(jié)果分析等。售后服務(wù):考慮儀器制造商的售后服務(wù)質(zhì)量,包括技術(shù)支持、維修保養(yǎng)、培訓(xùn)服務(wù)等。良好的售后服務(wù)可以幫助用戶(hù)解決在使用過(guò)程中遇到的問(wèn)題,確保儀器的正常運(yùn)行。TET 并不是一種特...
熒光標(biāo)記探針?lè)ㄔ恚菏褂靡环N特異性的熒光標(biāo)記探針,它能與目標(biāo) DNA 序列雜交。探針的 5' 端標(biāo)記有熒光報(bào)告基團(tuán),3' 端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)。在游離狀態(tài)下,報(bào)告基團(tuán)發(fā)出的熒光會(huì)被淬滅基團(tuán)吸收,無(wú)法檢測(cè)到熒光信號(hào)。當(dāng) PCR 反應(yīng)進(jìn)行時(shí),DNA 聚合酶在延伸引物的過(guò)程中,會(huì)將探針?biāo)?,使?bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,報(bào)告基團(tuán)發(fā)出的熒光信號(hào)就可以被儀器檢測(cè)到。每擴(kuò)增一條 DNA 鏈,就會(huì)有一個(gè)探針被水解,釋放出一個(gè)熒光信號(hào),熒光信號(hào)的強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量成正比。過(guò)程:在 PCR 反應(yīng)的退火階段,熒光標(biāo)記探針會(huì)與目標(biāo) DNA 序列特異性結(jié)合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性...