缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法，反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I（DNase I）、大腸桿菌DNA聚合酶I（DNA polymerase I）、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸（如dATP、dTTP、dCTP，”P—dGTP），其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機(jī)切開(kāi)若干個(gè)缺口（不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?，然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性，切去5’末端的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚合酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口．DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3’的方向移動(dòng)，DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)...

電子探針可以對(duì)試樣中微小區(qū)域（微米級(jí)）的化學(xué)組成進(jìn)行定性或定量分析?？梢赃M(jìn)行點(diǎn)、線掃描（得到層成分分布信息）、面掃描分析（得到成分面分布圖像）。還能全自動(dòng)進(jìn)行批量（預(yù)置9999測(cè)試點(diǎn)）定量分析。由于電子探針技術(shù)具有操作迅速簡(jiǎn)便（相對(duì)復(fù)雜的化學(xué)分析方法而言）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋直截了當(dāng)、分析過(guò)程不損壞樣品、測(cè)量準(zhǔn)確度較高等優(yōu)點(diǎn)，故在冶金、地質(zhì)、電子材料、生物、醫(yī)學(xué)、考古以及其它領(lǐng)域中得到日益***地應(yīng)用，是礦物測(cè)試分析和樣品成分分析的重要工具。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?；蛭⑿^(qū)域，小范圍直徑為1μm。楊浦區(qū)挑選探針五星服務(wù)早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細(xì)胞...

利用電子探針?lè)治龇椒梢蕴街牧蠘悠返幕瘜W(xué)組成以及各元素的重量百分?jǐn)?shù)。分析前要根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康闹苽錁悠?，樣品表面要清潔。用波譜儀分析樣品時(shí)要求樣品平整，否則會(huì)降低測(cè)得的X射線強(qiáng)度。定性分析1 點(diǎn)分析用于測(cè)定樣品上某個(gè)指定點(diǎn)的化學(xué)成分。下圖是用能譜儀得到的某鋼定點(diǎn)分析結(jié)果。能譜儀中的多道分析器可使樣品中所有元素的特征X射線信號(hào)同時(shí)檢測(cè)和顯示。不像波譜儀那樣要做全部譜掃描，甚至還要更換分光晶體。2 線分析用于測(cè)定某種元素沿給定直線分布的情況。方法是將X射線譜儀（波譜儀或能譜儀）固定在所要測(cè)量的某元素特征X射線信號(hào)（波長(zhǎng)或能量）的位置上，把電子束沿著指定的方向做直線軌跡掃描，便可得到該元素沿直線特征X射...

（3）X射線強(qiáng)度測(cè)量系統(tǒng)。特征X射線，由B系統(tǒng)中的計(jì)數(shù)管接收，并轉(zhuǎn)換成電脈沖，通過(guò)脈沖高度分析儀、計(jì)數(shù)率計(jì)、定標(biāo)器、電子電位計(jì)將其強(qiáng)度測(cè)量出來(lái)。（4）光學(xué)顯微鏡目測(cè)系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域，并作光學(xué)觀察。（5）背散射電子圖像系統(tǒng)。（6）吸收電子圖像系統(tǒng)。（7）特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學(xué)，主要應(yīng)用兩種方法：1）晶體衍射法（X射線光譜法）。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度，來(lái)衍射某種波長(zhǎng)的X射線，通過(guò)讀出晶體不同的衍射角，求出X射線的波長(zhǎng)，從而定出樣品所含的元素。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿足衍射條件。青浦區(qū)品牌探針商家安全**介紹，WiFi探針盒子確...

DNA探針可以用來(lái)診斷寄生蟲病，現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查及蟲種鑒定，可用于病毒性肝炎的診斷，遺傳性疾病的診斷，可用于檢測(cè)飲用水病毒含量。具體方法：用一個(gè)特定的DNA片段制成探針，與被測(cè)的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測(cè)出來(lái)。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點(diǎn)。傳統(tǒng)的檢測(cè)一次，需幾天或幾個(gè)星期的時(shí)間，精確度不高，而用DNA探針只需一天。據(jù)報(bào)道，能從1t水中檢測(cè)出10個(gè)病毒來(lái)，精確度**提高。RNA探針是一類很有前途的核酸探針，由于RNA是單鏈分子，所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高。探針卡是一種測(cè)試接口，主要對(duì)裸芯進(jìn)行測(cè)試，通過(guò)連接測(cè)試機(jī)和芯片，通過(guò)傳輸信號(hào)對(duì)芯片參數(shù)進(jìn)行測(cè)試.。長(zhǎng)寧區(qū)品牌探針按需定制探針DNA克隆...

探針卡是一種測(cè)試接口，主要對(duì)裸芯進(jìn)行測(cè)試，通過(guò)連接測(cè)試機(jī)和芯片，通過(guò)傳輸信號(hào)對(duì)芯片參數(shù)進(jìn)行測(cè)試.。2019年曝光的WiFi探針技術(shù),甚至無(wú)需用戶主動(dòng)連接WiFi即可捕獲個(gè)人信息。 [1]近年來(lái)半導(dǎo)體制程技術(shù)突飛猛進(jìn)，超前摩爾定律預(yù)估法則好幾年，現(xiàn)階段已向7奈米以下挺進(jìn)。產(chǎn)品講求輕薄短小，IC體積越來(lái)越小、功能越來(lái)越強(qiáng)、腳數(shù)越來(lái)越多，為了降低芯片封裝所占的面積與改善IC效能，現(xiàn)階段覆晶(Flip Chip)方式封裝普遍被應(yīng)用于繪圖芯片、芯片組、存儲(chǔ)器及CPU等。上述高階封裝方式單價(jià)高昂，如果能在封裝前進(jìn)行芯片測(cè)試，發(fā)現(xiàn)有不良品存在晶圓當(dāng)中，即進(jìn)行標(biāo)記，直到后段封裝制程前將這些標(biāo)記的不良品舍棄，可...

在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄，有時(shí)還存在反向轉(zhuǎn)錄（即生成反義RNA），這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外，在真核系統(tǒng)，某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生反義RNA，參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下，要準(zhǔn)確測(cè)定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針，而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測(cè)的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理，用特異的基因探針即識(shí)別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA（或RNA）分子，與被測(cè)定的靶序列互補(bǔ)，以檢測(cè)被測(cè)靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。通過(guò)鑒別其特征波長(zhǎng)或特征能量就可以確...

DNA探針根據(jù)其來(lái)源分為3種：一種來(lái)源于基因組中的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe），可以是基因的全序列，或者基因上的一段序列；另一種是從相應(yīng)的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）；此外，還可在體外人工合成20～50個(gè)堿基的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段，稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細(xì)菌為例，細(xì)菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個(gè)基因。要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針，通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫(kù)的辦法，即將細(xì)菌DN...

DNA探針是**常用的核酸探針，指長(zhǎng)度在幾百堿基對(duì)以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針。現(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多，有細(xì)菌、病毒、原蟲、***、動(dòng)物和人類細(xì)胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列，或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的，如細(xì)菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。以細(xì)菌為例，分子雜交技術(shù)用于細(xì)菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準(zhǔn)確的多，是細(xì)菌分類學(xué)的一個(gè)發(fā)展方向。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性，分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿足衍射條件。靜安區(qū)優(yōu)勢(shì)探針現(xiàn)價(jià)電子探...

早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復(fù)制過(guò)程中得到標(biāo)記的，標(biāo)記效率往往不高，且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的，而不是用于檢測(cè)。例如，在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類免疫缺陷病毒（HIV）的基因組DNA克隆時(shí)，因無(wú)DNA探針可利用，就利用HIV的全套標(biāo)記mRNA作為探針，成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進(jìn)行中的轉(zhuǎn)錄分析（nuclearrunontranscrip－tionassay）時(shí)，在體外將細(xì)胞核分離出來(lái)，然后在α-32P-ATP的存在下進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，所合成mR－NA均摻入同位素而得到標(biāo)記，此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾...

2、能譜儀來(lái)自樣品的X光子通過(guò)鈹窗口進(jìn)入鋰漂移硅固態(tài)檢測(cè)器。每個(gè)X光子能量被硅晶體吸收將在晶體內(nèi)產(chǎn)生電子空穴對(duì)。不同能量的X光子將產(chǎn)生不同的電子空穴對(duì)數(shù)。例如，F(xiàn)e的Kα輻射可產(chǎn)生1685個(gè)電子空穴對(duì)，而Cu為2110。知道了電子空穴對(duì)數(shù)就可以求出相應(yīng)的電荷量以及在固定電容（1μμF）上的電壓脈沖。多道脈沖高度分析器中的數(shù)模轉(zhuǎn)換器首先把脈沖信號(hào)轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)，建立起電壓脈沖幅值與道址的對(duì)應(yīng)關(guān)系（道址號(hào)與X光子能量間存在對(duì)應(yīng)關(guān)系）。電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。嘉定區(qū)挑選探針生產(chǎn)廠家2）X射線能譜分析法。無(wú)須分析晶體，而直接將探測(cè)器接收的訊號(hào)加以放大，進(jìn)行脈沖幅度分析，通過(guò)...

禽流感基因探針制備探針濃度鑒定將禽流感病毒H9N2亞型毒株**白(NP)基因3′端較為保守的、約350bp的編碼序列通過(guò)限制性內(nèi)切酶Hae¸切割、分離后,用隨機(jī)引物法制備Digoxigenin2112dUTP標(biāo)記探針。測(cè)定該探針的濃度為100Lgöml。特異性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該探針只能與實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的、含有NP基因的重組載體pGEM2TE2NP和pBacPAK2NP以及A型流感病毒H9N2亞型、H3N2亞型以及H9N3亞型毒株基因組RNA結(jié)合出現(xiàn)特異性的顏色反應(yīng),而與實(shí)驗(yàn)室常用的載體pGEM2Teasy、pBacPAK2His3、pTARGET和pGEMEX22以及新城疫病毒、傳染...

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核...

在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄，有時(shí)還存在反向轉(zhuǎn)錄（即生成反義RNA），這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外，在真核系統(tǒng)，某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生反義RNA，參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下，要準(zhǔn)確測(cè)定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針，而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測(cè)的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理，用特異的基因探針即識(shí)別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA（或RNA）分子，與被測(cè)定的靶序列互補(bǔ)，以檢測(cè)被測(cè)靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合...

用此探針在DNA文庫(kù)中篩選，陽(yáng)性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細(xì)胞和原核細(xì)胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列，而原核則沒(méi)有。因此，真核基因組DNA探針用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針（包括cDNA探針）的主要優(yōu)點(diǎn)有下面三點(diǎn)：①這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中，可以無(wú)限繁殖，取之不盡，制備方法簡(jiǎn)便。②DNA探針不易降解（相對(duì)RNA而言），一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟，有多種方法可供選擇，如缺口平移，隨機(jī)引物法，PCR標(biāo)記法等，能用于同位素和非同位素標(biāo)記。為此，一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個(gè)聚光鏡的結(jié)構(gòu)。黃浦...

探針的標(biāo)記也可以采用隨機(jī)引物法，即向變性的探針溶液加入6個(gè)核苷酸的隨機(jī)DNA小片段，作為引物，當(dāng)后者與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合后，按堿基互補(bǔ)原則不斷在其3’OH端添加同位素標(biāo)記的單核苷酸，這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標(biāo)記的單鏈DNA片段，可用來(lái)快速檢測(cè)病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記后制成的探針?？膳c固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，經(jīng)放射自顯影或其他檢測(cè)手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。電子探針是法國(guó)制成的，是在1949年用電子顯微鏡...

細(xì)菌的基因組大小約5×106bp，約含3000個(gè)基因。各種細(xì)菌之間絕大部分DNA是相同的，要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針，通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫(kù)的辦法，即將細(xì)菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫(kù)。然后用多種其它菌種的DNA作探針來(lái)篩選，產(chǎn)生雜交信號(hào)的克隆被剔除，***剩下的不與任何其它細(xì)菌雜交的克隆則可能含有該細(xì)菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標(biāo)記后作探針進(jìn)一步鑒定，亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來(lái)源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針，常常是比較繁瑣的。應(yīng)用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門。寶山區(qū)挑選探針售價(jià)（3）X射線強(qiáng)度測(cè)量系統(tǒng)。特征X射線，由B系統(tǒng)中...

特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣，也容易獲得，但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是，將特定的基因片段裝載到質(zhì)?；蚴删w中，經(jīng)過(guò)擴(kuò)增、酶切、純化等復(fù)雜的步驟，才能得到一定長(zhǎng)度的cDNA探針。這一過(guò)程比較復(fù)雜，有相應(yīng)條件的實(shí)驗(yàn)室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下，由核酸合成儀來(lái)完成，可廉價(jià)獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對(duì)來(lái)說(shuō)更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長(zhǎng)度通常為數(shù)百至數(shù)千個(gè)堿基，所以有良好的信號(hào)放大作用，但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個(gè)至數(shù)十個(gè)堿基，滲透性強(qiáng)，但信號(hào)放大作用則較差，合成的多相...

安全**介紹，WiFi探針盒子確實(shí)可以通過(guò)技術(shù)手段獲取個(gè)人信息，用戶為避免信息泄露，可以在出門后關(guān)閉手機(jī)連接WiFi的功能，并不要在一些不合規(guī)的APP上提供真實(shí)個(gè)人信息。律師表示，利用探針盒子獲取他人手機(jī)號(hào)等隱私信息的行為涉嫌侵犯他人隱私，可能面臨民事侵權(quán)責(zé)任及治安管理處罰責(zé)任。實(shí)現(xiàn)原理1. WiFi信道掃描工具WiFi探針實(shí)現(xiàn)原理示意圖這種神秘的Wi-Fi探針,實(shí)際是“WiFi信道掃描工具”。市面上的WiFi有2.4G、5G兩個(gè)頻段,每個(gè)頻段有不同的信道劃分,Wi-Fi探針設(shè)備通過(guò)在各個(gè)信道被動(dòng)監(jiān)測(cè),采集周圍的數(shù)據(jù)幀內(nèi)容,發(fā)現(xiàn)周邊手機(jī)、筆記本、路由器等無(wú)線設(shè)備,從而滿足客流統(tǒng)計(jì)、精細(xì)營(yíng)銷等需...

血凝素與生物素有非常高的親和性，當(dāng)血凝素標(biāo)記上過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶，經(jīng)雜交反應(yīng)**終形成探針-生物素-血凝素酶復(fù)合物（ABC法），酶催化底物顯色，觀察結(jié)果。ABC法底物顯色生成不溶物，以便觀測(cè)結(jié)果。酶標(biāo)記法復(fù)雜、重復(fù)性差，成本高，但便于運(yùn)輸、保存，靈敏度與放射物標(biāo)記法相當(dāng)。探針標(biāo)記方法①缺口平移標(biāo)記法。利用的是DNA聚合酶I能修復(fù)DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機(jī)切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸，同時(shí)在3´端修復(fù)加入被標(biāo)記核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、簡(jiǎn)便、成本相對(duì)較低、比活性相對(duì)較高、標(biāo)記均勻，多用于大分子DNA標(biāo)記，(...

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核...

DNA探針根據(jù)其來(lái)源分為3種：一種來(lái)源于基因組中的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe），可以是基因的全序列，或者基因上的一段序列；另一種是從相應(yīng)的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）；此外，還可在體外人工合成20～50個(gè)堿基的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段，稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細(xì)菌為例，細(xì)菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個(gè)基因。要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針，通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫(kù)的辦法，即將細(xì)菌DN...

（1）電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1～1μm，電子束穿透深度1～3μm。被激發(fā)原子發(fā)射特征X射線譜過(guò)程如下：圍繞原子核運(yùn)動(dòng)的內(nèi)層電子，被電子束的電子轟擊后，其他外層電子為補(bǔ)充轟擊出的電子而發(fā)生躍遷，在躍遷過(guò)程中釋放出能量，即發(fā)射出X射線。（2）X射線譜儀。測(cè)量各種元素產(chǎn)生的X射線波長(zhǎng)和強(qiáng)度，并以此對(duì)微小體積中所含元素進(jìn)行定性和定量分析。特征X射線圖像顯像管的原理是：X射線束入射到一已知晶面間距的晶體上（X射線分光光度計(jì)的彎曲晶體上），經(jīng)衍射后各種波長(zhǎng)的X射線按不同的布拉格角彼此分開(kāi)，因此如轉(zhuǎn)動(dòng)晶體，改變衍射角，同時(shí)以兩倍于晶體的轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)動(dòng)計(jì)數(shù)器，就可以依次測(cè)量出各種元素所產(chǎn)生的X射線波長(zhǎng)和強(qiáng)度，...

DNA探針（DNA probe）是**常用的核酸探針，為長(zhǎng)度在幾十到幾百甚至上千堿基對(duì)的單鏈或雙鏈DNA，用特殊示蹤劑（如同位素、酶或有色基團(tuán)）進(jìn)行標(biāo)記；在適當(dāng)?shù)膒H值、溫度和離子強(qiáng)度下，DNA探針利用分子的變性、復(fù)性以及堿基互補(bǔ)配對(duì)的高度精確性，能與待測(cè)樣本中互補(bǔ)的非標(biāo)記單鏈DNA或RNA以氫鍵結(jié)合（雜交），形成雙鏈復(fù)合物（雜交體）。雜交體的穩(wěn)定性取決于兩條單鏈核苷酸之間的互補(bǔ)程度。在嚴(yán)格的條件下（高pH值、高溫、低離子強(qiáng)度），不完全匹配的雜交體的兩鏈將會(huì)解離，而完全匹配的雜交體將保持雙鏈。將未配對(duì)結(jié)合的探針洗去后，可用放射自顯影或酶聯(lián)反應(yīng)等檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)雜交反應(yīng)結(jié)果。（1）電子光學(xué)系統(tǒng)。電子...

細(xì)菌的基因組大小約5×106bp，約含3000個(gè)基因。各種細(xì)菌之間絕大部分DNA是相同的，要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針，通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫(kù)的辦法，即將細(xì)菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫(kù)。然后用多種其它菌種的DNA作探針來(lái)篩選，產(chǎn)生雜交信號(hào)的克隆被剔除，***剩下的不與任何其它細(xì)菌雜交的克隆則可能含有該細(xì)菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標(biāo)記后作探針進(jìn)一步鑒定，亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來(lái)源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針，常常是比較繁瑣的。由分光晶體所分散的單一波長(zhǎng)X射線被X射線檢測(cè)器接受，常用的檢測(cè)器一般是正比計(jì)數(shù)器。普陀區(qū)標(biāo)準(zhǔn)探針品牌電子探針...

電子探針?lè)治鍪侵敢跃劢沟母咚匐娮觼?lái)激發(fā)出試樣表面組成元素的特征X射線，對(duì)微區(qū)成分進(jìn)行定性或定量分析的一種材料物理試驗(yàn)，又稱電子探針X射線顯微分析。電子探針?lè)治龅脑硎牵阂詣?dòng)能為10～30千電子伏的細(xì)聚焦電子束轟擊試樣表面，擊出表面組成元素的原子內(nèi)層電子，使原子電離，此時(shí)外層電子迅速填補(bǔ)空位而釋放能量，從而產(chǎn)生特征X射線。電子探針的功能主要是進(jìn)行微區(qū)成分分析。它是在電子光學(xué)和X射線光譜學(xué)原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種高效率分析儀器。其原理是用細(xì)聚焦電子束入射樣品表面，激發(fā)出樣品元素的特征x射線，分析特征X射線的波長(zhǎng)（或特征能量）即可知道樣品中所含元素的種類（定性分析），分析X射線的強(qiáng)度，則可知道樣品...

（1）電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1～1μm，電子束穿透深度1～3μm。被激發(fā)原子發(fā)射特征X射線譜過(guò)程如下：圍繞原子核運(yùn)動(dòng)的內(nèi)層電子，被電子束的電子轟擊后，其他外層電子為補(bǔ)充轟擊出的電子而發(fā)生躍遷，在躍遷過(guò)程中釋放出能量，即發(fā)射出X射線。（2）X射線譜儀。測(cè)量各種元素產(chǎn)生的X射線波長(zhǎng)和強(qiáng)度，并以此對(duì)微小體積中所含元素進(jìn)行定性和定量分析。特征X射線圖像顯像管的原理是：X射線束入射到一已知晶面間距的晶體上（X射線分光光度計(jì)的彎曲晶體上），經(jīng)衍射后各種波長(zhǎng)的X射線按不同的布拉格角彼此分開(kāi)，因此如轉(zhuǎn)動(dòng)晶體，改變衍射角，同時(shí)以兩倍于晶體的轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)動(dòng)計(jì)數(shù)器，就可以依次測(cè)量出各種元素所產(chǎn)生的X射線波長(zhǎng)和強(qiáng)度，...

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核...

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核...

探針DNA克隆的篩選也可采用血清學(xué)方法，所不同的是所建DNA文庫(kù)為可表達(dá)性，克隆菌落或噬斑經(jīng)裂解后釋放出表達(dá)抗原，然后用來(lái)源細(xì)菌的多克隆抗血清篩選陽(yáng)性克隆，所得到多個(gè)陽(yáng)性克隆再經(jīng)其它細(xì)菌的抗血清篩選，***只與本細(xì)菌抗血清反應(yīng)的表達(dá)克隆即含有此細(xì)菌的特異性基因片段，它所編碼的蛋白是該菌種所特有的。用這種表達(dá)文庫(kù)篩選得到的顯然只是特定基因探針。對(duì)于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質(zhì)的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質(zhì)，然后測(cè)定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列，然后根據(jù)這一序列合成一套寡核苷酸探針。光學(xué)顯微鏡目測(cè)系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域，并作光學(xué)觀察...