江蘇重組蛋白內(nèi)毒素檢測(cè)低內(nèi)毒素回收

湖州申科生物細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（CSE）源自大腸桿菌（E.coli O111:B4），經(jīng)過提取精制獲得脂多糖，并以細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品為基準(zhǔn)標(biāo)定效價(jià)，每支效價(jià)處于 10 - 100EU ，量值準(zhǔn)確且可靠。在工業(yè)內(nèi)毒素檢測(cè)中，該標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用廣且關(guān)鍵。首先，能用于鱟試劑靈敏度復(fù)核實(shí)驗(yàn)，幫助檢測(cè)人員準(zhǔn)確確認(rèn)鱟試劑對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素的敏感程度，保障檢測(cè)方法的有效性；其次，可開展干擾試驗(yàn)，評(píng)估樣品中可能存在的干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，以便優(yōu)化檢測(cè)流程和方法；再者，能充當(dāng)各種陽性對(duì)照，為檢測(cè)過程提供參照，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。這款標(biāo)準(zhǔn)品不僅適用于凝膠法鱟試劑系列實(shí)驗(yàn)，在光度法鱟試劑系列實(shí)驗(yàn)中同樣能發(fā)揮重要作用。使用時(shí)，只需參照中國藥典2025版第四部通則 1143 的相關(guān)介紹進(jìn)行操作即可。憑借效價(jià)標(biāo)定準(zhǔn)確和適用性的優(yōu)勢(shì)，該標(biāo)準(zhǔn)品為生物制品、化學(xué)藥品等各類樣品的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)提供了穩(wěn)定且可靠的標(biāo)準(zhǔn)，助力企業(yè)和檢測(cè)機(jī)構(gòu)嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量，滿足法規(guī)要求。

低內(nèi)毒素回收（LER）又稱內(nèi)毒素掩蔽，是指無菌制劑（尤其蛋白類生物制劑）進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，加標(biāo)內(nèi)毒素的回收率＜50% 的現(xiàn)象，且無法通過稀釋排除，區(qū)別于傳統(tǒng)檢測(cè)干擾。LER 會(huì)導(dǎo)致內(nèi)毒素污染被低估，已被全球監(jiān)管機(jī)構(gòu)重點(diǎn)關(guān)注：FDA 2013 年要求生物藥 BLA 申報(bào)時(shí)提交 LER 研究報(bào)告；EMA 2023 年明確含表面活性劑（如吐溫）或螯合劑（如 EDTA）的制劑需提供 LER 數(shù)據(jù)；中國藥典 2025 版 9251 通則也新增 LER 內(nèi)容，與國際接軌。這些要求促使企業(yè)優(yōu)化內(nèi)毒素檢測(cè)流程，避免因 LER 導(dǎo)致的檢測(cè)偏差，確保藥品安全。

湖州申科生物凝膠法鱟試劑憑借合規(guī)性和實(shí)用性，成為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)毒素定量檢測(cè)的優(yōu)先選擇。該產(chǎn)品嚴(yán)格符合 USP、EP、中國藥典標(biāo)準(zhǔn)，提供 0.03、0.06、0.125、0.25、0.5EU/mL 等多種靈敏度規(guī)格，適配不同樣品的限值要求。設(shè)計(jì)上采用大瓶裝量（10 反應(yīng) / 支），減少瓶間差異和頻繁開瓶導(dǎo)致的污染風(fēng)險(xiǎn)，降低單位測(cè)試成本。針對(duì)血源制品、中藥注射劑等復(fù)雜基質(zhì)樣品，配套特異性抗增液（NND071）可高效抑制非特異性反應(yīng)，減少假陽性結(jié)果。包裝選用易開啟西林瓶，避免操作時(shí)玻璃碎屑污染，提升使用安全性。憑借千家醫(yī)院的臨床使用經(jīng)驗(yàn)和穩(wěn)定的性能表現(xiàn)，該產(chǎn)品更適合血源制品及復(fù)雜基質(zhì)。

隨著生物制藥行業(yè)的快速發(fā)展，注射用藥劑、疫苗等制劑及植入性醫(yī)療器械的生產(chǎn)需求激增，直接推動(dòng)了內(nèi)毒素檢測(cè)試劑的市場(chǎng)需求。然而，傳統(tǒng)內(nèi)毒素檢測(cè)嚴(yán)重依賴天然鱟試劑，而全球鱟資源正面臨衰減危機(jī)。2021 年 2 月，我國國家林業(yè)和草原局、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部聯(lián)合公告將鱟科動(dòng)物列為國家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，嚴(yán)格限制捕撈配額，導(dǎo)致天然鱟試劑價(jià)格持續(xù)上漲，甚至出現(xiàn)關(guān)鍵檢測(cè)環(huán)節(jié)的供應(yīng)短缺問題。在此背景下，湖州申科研發(fā)的重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）通過基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)無動(dòng)物源性生產(chǎn)，徹底擺脫對(duì)鱟血資源的依賴。該試劑支持 “減少、替代、優(yōu)化” 的 3R 動(dòng)物保護(hù)原則，不僅解決了資源受限的行業(yè)痛點(diǎn)，還能保障長期穩(wěn)定供應(yīng)，為內(nèi)毒素檢測(cè)領(lǐng)域的可持續(xù)發(fā)展提供了理想解決方案。

內(nèi)毒素檢測(cè)方法驗(yàn)證需覆蓋多項(xiàng)參數(shù)，確保方法可靠：線性范圍需包含樣品預(yù)期濃度（如 0.01-10 EU/mL），相關(guān)系數(shù) R2≥0.98；準(zhǔn)確度通過加標(biāo)回收率評(píng)估，應(yīng)在 50%-200% 范圍內(nèi)；精密度包括批內(nèi)和批間精密度，CV 值均應(yīng)≤15%；檢測(cè)限（LOD）需低于產(chǎn)品限值的 1/2（如限值 0.5 EU/mL，LOD 應(yīng)≤0.25 EU/mL）；專屬性需證明無干擾物質(zhì)影響（如 β- 葡聚糖、蛋白質(zhì)不引發(fā)假陽性）。驗(yàn)證通過后，方法需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)方可使用，且定期需進(jìn)行一次回顧性驗(yàn)證，確認(rèn)方法持續(xù)有效。

內(nèi)毒素檢測(cè)重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）與天然鱟試劑在原料、性能和可持續(xù)性上存在本質(zhì)區(qū)別。原料方面，天然鱟試劑依賴鱟血采集，受動(dòng)物資源限制，而 rCR 通過基因工程表達(dá) C、B 因子及凝固酶原，無動(dòng)物源性，供應(yīng)穩(wěn)定。特異性上，天然鱟試劑因含 G 因子，易與 β-D 葡聚糖反應(yīng)產(chǎn)生假陽性，而 rCR 剔除 G 因子，只對(duì)內(nèi)毒素特異性響應(yīng)，從機(jī)制上消除干擾。批間一致性方面，天然鱟試劑受鱟個(gè)體差異影響，批間 CV 值較高；rCR 成分明確且生產(chǎn)工藝標(biāo)準(zhǔn)化，批間差異明顯降低，CV 值≤15%。兩者靈敏度相當(dāng)（0.005EU/mL），但 rCR 無需面臨鱟資源政策限制，更符合動(dòng)物福利趨勢(shì)和長期質(zhì)控需求，是天然鱟試劑的理想替代。