上海通用型宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方法對(duì)比

來源： 發(fā)布時(shí)間：2025-11-04

在宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)的分析方法里，ELISA法應(yīng)用較多，也是QC日常放行檢測(cè)的主要方式。該方法操作相對(duì)簡(jiǎn)便、檢測(cè)精度較好，便于設(shè)定控制范圍與制定技術(shù)規(guī)范，適用于產(chǎn)品開發(fā)及過程控制；不過，ELISA檢測(cè)依賴抗原與抗體的特異性結(jié)合，因此以生物制品中HCP為免疫原制備的抗體質(zhì)量，對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響極大。無(wú)論是市售ELISA試劑盒，還是實(shí)驗(yàn)室自制的多克隆抗體，若抗體的特異性與適用性不足，都可能導(dǎo)致HCP漏檢，進(jìn)而給生物制品質(zhì)量安全埋下隱患。另外，ELISA檢測(cè)HCP時(shí)采用多克隆抗體，無(wú)法針對(duì)性反映高風(fēng)險(xiǎn)HCP殘留蛋白的實(shí)際存在狀況。
抗體覆蓋率評(píng)估分析需要考慮不同方法間存在的差異，以及如何持續(xù)改進(jìn)和評(píng)估方法實(shí)驗(yàn)過程的質(zhì)量控制。上海通用型宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方法對(duì)比

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由于宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)試劑盒關(guān)鍵組分（校準(zhǔn)品、檢測(cè)抗體）存在固有且明顯的變異度，不同試劑盒對(duì)同一樣本的檢測(cè)結(jié)果，不僅可能在數(shù)值上出現(xiàn)較大差距，在特定 HCP（如低豐度或高風(fēng)險(xiǎn) HCP）的檢出能力上，也可能存在明顯偏差，這對(duì)生物制品 HCP 殘留的準(zhǔn)確管控構(gòu)成挑戰(zhàn)。因此，為確保檢測(cè)結(jié)果能真實(shí)反映自身產(chǎn)品的 HCP 殘留狀況，企業(yè)必須結(jié)合自身產(chǎn)品特性（如宿主細(xì)胞類型、目標(biāo)產(chǎn)物屬性）與生產(chǎn)工藝特點(diǎn)，對(duì)不同品牌、不同類型的試劑盒開展系統(tǒng)且詳細(xì)的平行比對(duì)實(shí)驗(yàn)。同時(shí)，還需進(jìn)行針對(duì)性的適用性評(píng)估，驗(yàn)證試劑盒對(duì)自身產(chǎn)品的檢測(cè)準(zhǔn)確性、特異性及穩(wěn)定性，再篩選出與自身產(chǎn)品匹配度適合的檢測(cè)方案，為生物制品的 HCP 殘留控制提供可靠技術(shù)支撐，保障產(chǎn)品質(zhì)量與用藥安全。
釀酒酵母宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)抗體制備臨床 III 期及商業(yè)化生產(chǎn)階段，法規(guī)推薦用定制化 HCP ELISA 試劑盒保障檢測(cè)針對(duì)性。

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湖州申科生物依托先進(jìn)的整合技術(shù)平臺(tái)，在 HCP 檢測(cè)領(lǐng)域構(gòu)筑優(yōu)勢(shì)。公司自主研發(fā)出突破性技術(shù)，包括基于 IMBS 的抗體覆蓋率檢測(cè)方法與基于核酸文庫(kù)的低豐度 HCP 富集技術(shù)，有效提升 HCP 檢測(cè)靈敏度與抗體覆蓋能力，相關(guān)成果已在《中國(guó)新藥雜志》《藥物分析雜志》等期刊發(fā)表，且被納入國(guó)家科技重大專項(xiàng)。同時(shí)，借助前沿的精密分析平臺(tái)，湖州申科打造了覆蓋完整 HCP 分析鏈條的 LC-MS 解決方案，涵蓋抗原一致性評(píng)價(jià)、IMBS 前處理、低豐度蛋白富集、生信分析及專屬數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，構(gòu)建起從樣品管理到風(fēng)險(xiǎn)分析的閉環(huán)體系。該平臺(tái)嚴(yán)格遵循法規(guī)要求，所有檢測(cè)技術(shù)均通過符合 ICH 及藥典標(biāo)準(zhǔn)的方法學(xué)驗(yàn)證，確保檢測(cè)數(shù)據(jù)可靠，且滿足生物制品申報(bào)（如 IND/BLA）的法規(guī)要求。憑借這一技術(shù)整合能力，公司已為國(guó)內(nèi)外上百家生物醫(yī)藥企業(yè)提供從工藝開發(fā)到質(zhì)控放行的一站式 HCP 檢測(cè)服務(wù)，助力單抗、疫苗等產(chǎn)品提升安全性與合規(guī)性。

宿主細(xì)胞蛋白（HCP）ELISA 定制化開發(fā)平臺(tái)需具備完善的開發(fā)體系、可靠的技術(shù)平臺(tái)與專業(yè)的開發(fā)團(tuán)隊(duì)，以此實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)符合法規(guī)要求的試劑盒。其中，校準(zhǔn)品作為關(guān)鍵原材料，其良好的穩(wěn)定性與溯源保障對(duì)試劑盒生命周期至關(guān)重要。為確保校準(zhǔn)品穩(wěn)定，通常采用凍干工藝制備，通過單因素方差分析方法評(píng)估其均一性，并依據(jù)法規(guī)規(guī)定的蛋白定量方法為校準(zhǔn)品賦值，同時(shí)溯源至國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（如有）或 BSA 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，從源頭保障檢測(cè)的準(zhǔn)確性與合規(guī)性，為后續(xù)檢測(cè)體系的可靠運(yùn)行奠定基礎(chǔ)。
基于HCP的復(fù)雜性，檢測(cè)中常遇到中間品，尤其是原液樣品無(wú)法達(dá)到稀釋線性，可能與樣品基質(zhì)的干擾有關(guān)。

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宿主細(xì)胞蛋白（HCP）是生物制品中源自細(xì)胞基質(zhì)的殘留雜質(zhì)，異質(zhì)性特征明顯。其復(fù)雜性主要體現(xiàn)在三方面：①理化特性差異：包含胞內(nèi)與分泌蛋白（涉及關(guān)鍵生理功能），等電點(diǎn)（pI 3-11）、分子量（5-250kDa）及疏水性的區(qū)間跨度大；②上游工藝影響：不同發(fā)酵工藝（如細(xì)胞株選擇、培養(yǎng)條件控制）會(huì)誘導(dǎo)獨(dú)特的翻譯后修飾（PTM），進(jìn)而增加 HCP 的總量與生化復(fù)雜性；③下游工藝與產(chǎn)物特性干擾：抗體、細(xì)胞因子等重組蛋白或病毒類藥物的純化工藝，會(huì)選擇性殘留特定 HCP；同時(shí)，產(chǎn)物形式（如大腸桿菌的包涵體 / 可溶性表達(dá)）也會(huì)直接影響 HCP 的殘留譜。針對(duì)特定生產(chǎn)工藝開發(fā)定制化檢測(cè)方案，是準(zhǔn)確監(jiān)控 HCP 殘留的關(guān)鍵所在。
HCP具有異質(zhì)性，體現(xiàn)在分子本身的多樣性以及和工藝相關(guān)的變異性。宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)高風(fēng)險(xiǎn)蛋白

定制化宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測(cè)試劑盒產(chǎn)生的HCP抗體特異性更好，能檢出高風(fēng)險(xiǎn)HCP。上海通用型宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方法對(duì)比

美國(guó)藥典（USP）1132 章節(jié)中，推薦的 HCP 抗體純化方式有兩種，分別是 Protein A/Protein G 親和柱層析法與 HCP 抗原親和柱層析法。這兩種方法各有特點(diǎn)與不足，且均滿足監(jiān)管層面的要求。在實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景中，針對(duì)不同產(chǎn)品，兩種方法可能造成檢測(cè)結(jié)果的差異。兩種方法所獲抗體的關(guān)鍵差異，在于 HCP 抗體有效含量的占比不同。其中，HCP 抗原親和柱層析法的有效含量占比明顯更高，但該方法存在部分 HCP 抗體流失的情況，這會(huì)使得針對(duì)特定樣本的檢測(cè)結(jié)果低于前者，因此企業(yè)在實(shí)際建立檢測(cè)方法時(shí)，需開展充分評(píng)估。此外，HCP 抗原親和柱層析法對(duì)純化工藝的要求更為嚴(yán)格，若要確保抗體的批間一致性，需重點(diǎn)考察 HCP 抗原柱的制備工藝、柱子的使用壽命以及再次制備時(shí)的一致性等關(guān)鍵問題。
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