河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法

來(lái)源： 發(fā)布時(shí)間：2025-11-20

質(zhì)控結(jié)果是支原體 NAT 檢測(cè)可靠性的前提，需嚴(yán)格遵循判定標(biāo)準(zhǔn)，且需結(jié)合實(shí)驗(yàn)室實(shí)際條件驗(yàn)證適配的標(biāo)準(zhǔn)閾值。質(zhì)控樣品的判定規(guī)則明確：NTC（無(wú)模板對(duì)照）的 FAM 信號(hào)需 2 復(fù)孔 Ct≥40 或無(wú)明顯擴(kuò)增曲線(xiàn)，VIC 信號(hào)需 2 復(fù)孔 Ct<35 且呈有效 “S” 型擴(kuò)增；NCS（陰性對(duì)照）判定標(biāo)準(zhǔn)與 NTC 一致；PC（陽(yáng)性質(zhì)控）的 FAM 信號(hào)需 2 復(fù)孔 Ct<35 且呈有效 “S” 型擴(kuò)增，PCS（陽(yáng)性對(duì)照底物）判定標(biāo)準(zhǔn)與 PC 一致。只有質(zhì)控結(jié)果全部滿(mǎn)足要求，才能進(jìn)一步分析樣本結(jié)果，若質(zhì)控不達(dá)標(biāo)，需排查設(shè)備、試劑、操作等環(huán)節(jié)的問(wèn)題并重新檢測(cè)。
全血基質(zhì)中100 CFU/mL支原體，湖州申科支原體檢測(cè)試劑盒通過(guò)優(yōu)化提取流程實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定擴(kuò)增與檢出。河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法

河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法,支原體檢測(cè)

菌株質(zhì)量是支原體檢測(cè) NAT 方法驗(yàn)證合規(guī)的關(guān)鍵，GC/CFU 比（基因組拷貝數(shù)與菌落形成單位比值）是關(guān)鍵控制指標(biāo)。支原體存在聚集特性，單一 CFU 可能對(duì)應(yīng)多個(gè)菌體，且 DNA 復(fù)制與細(xì)胞分裂不同步，部分菌體無(wú)法形成菌落但會(huì)釋放 DNA，導(dǎo)致 GC/CFU 比波動(dòng)大（研究報(bào)道 0.1 CFU 對(duì)應(yīng) 30-500 個(gè)基因組拷貝）。若使用高 GC/CFU 比菌株，會(huì)高估檢測(cè)限、導(dǎo)致方法靈敏度不足，因此法規(guī)明確要求菌株 GC/CFU 比＜10。2024 年 EDQM 36.1 草案規(guī)定參考品 GC/CFU 比應(yīng)小于 10，USP 77 征求意見(jiàn)稿要求表征菌株 GC/CFU 比、建立菌株庫(kù) CFU 與核酸拷貝數(shù)關(guān)系，JP G3-14-170 也對(duì)菌株質(zhì)量提出明確要求，凸顯合規(guī)菌株選擇的重要性。
河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法CAR-T 產(chǎn)品支原體檢測(cè)需在放行前快速完成，湖州申科快速版試劑盒 2.5 小時(shí)可出結(jié)果。

河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法,支原體檢測(cè)

培養(yǎng)基的科學(xué)選擇與合規(guī)使用是支原體培養(yǎng)法檢測(cè)成功的基礎(chǔ)，湖州申科按 USP 標(biāo)準(zhǔn)明確了三類(lèi)推薦培養(yǎng)基的適用場(chǎng)景。Hayflick Media 用于支原體一般性檢測(cè)，F(xiàn)rey Media 專(zhuān)門(mén)針對(duì)滑液囊支原體檢測(cè)，F(xiàn)riis Media 則適用于非禽類(lèi)支原體檢測(cè)。為確保少量支原體（約 100cfu 或 100ccu）不被遺漏，需使用足夠數(shù)量的固體與液體培養(yǎng)基開(kāi)展檢測(cè)；若選用其他替代培養(yǎng)基，必須嚴(yán)格符合 USP 標(biāo)準(zhǔn)要求。此外，每批培養(yǎng)基均需進(jìn)行針對(duì)性的微生物檢測(cè)（即營(yíng)養(yǎng)特性測(cè)試），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的質(zhì)量把控，避免因培養(yǎng)基性能缺陷導(dǎo)致檢測(cè)失效，為后續(xù)檢測(cè)流程提供穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)條件。

MycoSHENTEK® 支原體 DNA 校準(zhǔn)品作為 NAT 檢測(cè)的關(guān)鍵輔助試劑，采用質(zhì)粒 DNA 制備，從根源上消除了污染風(fēng)險(xiǎn)，使用更安全。該校準(zhǔn)品主要用于驗(yàn)證支原體 NAT 檢測(cè)的靈敏度，以及校準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù)與 Ct 值的線(xiàn)性關(guān)系，為檢測(cè)方法的定量準(zhǔn)確性提供保障。產(chǎn)品采用 DNA 稀釋液進(jìn)行系列梯度稀釋?zhuān)僮骱?jiǎn)便高效，無(wú)需復(fù)雜預(yù)處理；同時(shí)具備極強(qiáng)的專(zhuān)屬性，不受其他種屬 DNA 干擾，耐用性突出，可在不同實(shí)驗(yàn)條件下保持性能穩(wěn)定。其標(biāo)準(zhǔn)化的特性使其成為生物制品企業(yè)開(kāi)展支原體檢測(cè)方法驗(yàn)證、日常質(zhì)量控制校準(zhǔn)的理想選擇，助力檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。
支原體檢測(cè)取樣需按產(chǎn)品體積設(shè)計(jì)，10-1000mL 樣品取總體積 1%，保障結(jié)果代表性。

河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法,支原體檢測(cè)

湖州申科的支原體檢測(cè)方案已在多個(gè)領(lǐng)域積累了豐富的客戶(hù)申報(bào)案例，覆蓋細(xì)胞療法、抗體藥物、疫苗、CRO/CDMO 等細(xì)分賽道。在細(xì)胞療法領(lǐng)域，方案成功應(yīng)用于已上市藥物的方法變更，替換進(jìn)口試劑盒并通過(guò)中檢院復(fù)核，驗(yàn)證結(jié)果獲得 CDE 認(rèn)可用于產(chǎn)品放行檢測(cè)在抗體藥物領(lǐng)域，支持多家企業(yè)完成 BLA 申報(bào)；在疫苗與 CRO/CDMO 領(lǐng)域，為諸多頭部企業(yè)提供 IND 申報(bào)支持。方案的應(yīng)用場(chǎng)景涵蓋從 IND 到 BLA/NDA 的全申報(bào)周期，適配自動(dòng)化提取 + 檢測(cè)試劑盒 + 菌株 + qPCR 儀、外源因子一體機(jī)等多種配置，滿(mǎn)足不同企業(yè)的個(gè)性化檢測(cè)需求，獲得市場(chǎng)認(rèn)可。
支原體檢測(cè)需驗(yàn)證專(zhuān)屬性，避免與革蘭氏陽(yáng)性菌交叉反應(yīng)，確保結(jié)果準(zhǔn)確。河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法

支原體檢測(cè)中，檢測(cè)限驗(yàn)證需對(duì)每種支原體做3次10倍梯度稀釋?zhuān)@取24個(gè)數(shù)據(jù)滿(mǎn)足95%檢出率。河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法

針對(duì)新型生物制品中 10?細(xì)胞基質(zhì)、全血、1mg/mL 高濃度質(zhì)粒、5% 人白等特殊復(fù)雜樣品基質(zhì)，MycoSHENTEK® 支原體 qPCR 檢測(cè)試劑盒（2G）進(jìn)行了方法性能驗(yàn)證，展現(xiàn)出極強(qiáng)的樣品適用性。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，在 CHO-S&Vero 細(xì)胞（10?個(gè)）、5% 人血白蛋白、全血等基質(zhì)中，該試劑盒對(duì) 10 CFU/mL 或 100 CFU/mL 的支原體均能穩(wěn)定檢出，擴(kuò)增曲線(xiàn)清晰可靠。其優(yōu)化的前處理流程與檢測(cè)體系有效規(guī)避了復(fù)雜基質(zhì)的干擾，無(wú)需額外傳代步驟，徹底解決了傳統(tǒng)方法在復(fù)雜樣品檢測(cè)中易受抑制、結(jié)果不準(zhǔn)的問(wèn)題，覆蓋病毒、培養(yǎng)液、成品等多種樣品類(lèi)型。
河南生物制品支原體檢測(cè)培養(yǎng)法