無(wú)錫YELLOW熒光定量PCR儀

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-10-24

定量熒光定量 PCR 儀的數(shù)據(jù)分析軟件是保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的 “重要大腦”,具備三大關(guān)鍵功能:一是 Ct 值自動(dòng)計(jì)算,軟件通過(guò)算法識(shí)別熒光信號(hào)的基線(xiàn)期與指數(shù)增長(zhǎng)期,自動(dòng)設(shè)定閾值(通常為基線(xiàn)信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)差的 10 倍),計(jì)算熒光信號(hào)達(dá)閾值時(shí)的循環(huán)數(shù)(Ct 值),避免手動(dòng)設(shè)定閾值導(dǎo)致的主觀誤差;二是熔解曲線(xiàn)分析,PCR 擴(kuò)增結(jié)束后,儀器通過(guò) 0.1-1℃/s 的速率緩慢升溫,軟件實(shí)時(shí)記錄熒光信號(hào)變化,特異性擴(kuò)增產(chǎn)物會(huì)出現(xiàn)單一熔解峰(如 Tm 值 85℃左右),若出現(xiàn)多個(gè)峰則提示非特異性擴(kuò)增或污染,軟件可自動(dòng)標(biāo)記可疑樣本;三是質(zhì)控管理,軟件可自動(dòng)監(jiān)測(cè)陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、內(nèi)參基因的 Ct 值,若對(duì)照樣本異常則發(fā)出警報(bào),避免錯(cuò)誤結(jié)果輸出。例如在臨床乙肝病毒檢測(cè)中,若軟件發(fā)現(xiàn)某樣本熔解曲線(xiàn)出現(xiàn)兩個(gè)峰,會(huì)自動(dòng)標(biāo)記為 “可疑樣本”,提示操作人員重新檢測(cè),降低誤診風(fēng)險(xiǎn)。此外,軟件支持?jǐn)?shù)據(jù)導(dǎo)出(如 Excel、PDF 格式),包含 Ct 值、熔解曲線(xiàn)圖譜、定量結(jié)果等信息,方便科研人員與臨床醫(yī)生進(jìn)行結(jié)果追溯與分析。對(duì)于一些難以培養(yǎng)或培養(yǎng)周期較長(zhǎng)的細(xì)菌,熒光定量 PCR 儀可以快速檢測(cè)其特定的核酸序列,實(shí)現(xiàn)早期診斷。無(wú)錫YELLOW熒光定量PCR儀

無(wú)錫YELLOW熒光定量PCR儀,熒光定量PCR儀

你可能想說(shuō)的是 “實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀”。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀是一種用于對(duì)核酸進(jìn)行定量分析的儀器,在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。工作原理實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀基于 PCR 技術(shù),在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè) PCR 進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析。例如,常用的 SYBR Green I 染料,在游離狀態(tài)下熒光微弱,與雙鏈 DNA 結(jié)合后熒光明顯增強(qiáng),隨著 PCR 產(chǎn)物的合成,熒光信號(hào)不斷增加,儀器可實(shí)時(shí)檢測(cè)到這種變化。南京 ROX熒光定量PCR儀微量檢測(cè)若溫度控制不準(zhǔn)確,會(huì)導(dǎo)致 PCR 反應(yīng)效率降低、特異性下降,產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增,影響熒光信號(hào)準(zhǔn)確性;

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熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于多個(gè)行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):生命科學(xué)研究行業(yè)基因表達(dá)分析:是研究基因表達(dá)調(diào)控的重要工具,可精確測(cè)定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理病理?xiàng)l件下基因的表達(dá)水平,有助于深入了解基因的功能和生物過(guò)程的分子機(jī)制?;蚬δ苎芯浚和ㄟ^(guò)對(duì)基因敲除、過(guò)表達(dá)或 RNA 干擾等模型中相關(guān)基因表達(dá)量的定量分析,驗(yàn)證基因的功能,揭示基因之間的相互作用關(guān)系。分子進(jìn)化研究:分析不同物種或同一物種不同個(gè)體之間基因

ROX原理:主要用于熒光定量 PCR 中的校正和歸一化。在反應(yīng)體系中,ROX 的熒光強(qiáng)度相對(duì)穩(wěn)定,不受 PCR 反應(yīng)過(guò)程的影響。通過(guò)檢測(cè) ROX 的熒光信號(hào),可以對(duì)其他熒光染料的信號(hào)進(jìn)行校正,消除由于加樣誤差、反應(yīng)體積差異、儀器波動(dòng)等因素引起的熒光信號(hào)變化,提高定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。特點(diǎn):激發(fā)波長(zhǎng)約為 570nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 590nm,熒光顏色為紅色。ROX 通常與其他熒光染料如 FAM、VIC 等配合使用,在多重?zé)晒舛?PCR 中,為每個(gè)反應(yīng)孔提供一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)參熒光信號(hào),以便對(duì)不同孔之間的熒光信號(hào)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。判斷食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分以及轉(zhuǎn)基因成分的含量,保障消費(fèi)者的知情權(quán)和選擇權(quán)。

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光學(xué)系統(tǒng):包括光源、激發(fā)和發(fā)射濾光片、檢測(cè)器等。光源提供激發(fā)熒光染料所需的能量,濾光片用于選擇特定波長(zhǎng)的光,檢測(cè)器負(fù)責(zé)檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度。如 ABI StepOne Plus 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀的光學(xué)系統(tǒng)能精確檢測(cè)不同熒光染料發(fā)出的信號(hào)。熱循環(huán)系統(tǒng):用于控制 PCR 反應(yīng)的溫度變化,包括變性、退火和延伸等步驟。它需要具備快速升降溫的能力,以保證 PCR 反應(yīng)的高效進(jìn)行。例如,Roche LightCycler 480 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀的熱循環(huán)系統(tǒng)升溫速度快,能有效縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。控制系統(tǒng):負(fù)責(zé)儀器的操作和數(shù)據(jù)處理,可設(shè)置 PCR 反應(yīng)的參數(shù),如循環(huán)次數(shù)、溫度、時(shí)間等,還能對(duì)檢測(cè)到的熒光信號(hào)進(jìn)行分析和處理,生成定量結(jié)果。TET 熒光染料常被用于熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn),它可以與其他熒光染料如 FAM、VIC 等一起;南通HEX熒光定量PCR儀型號(hào)

并且,TET 染料具有較高的熒光量子產(chǎn)率,即在受到激發(fā)后能夠高效地發(fā)出熒光。無(wú)錫YELLOW熒光定量PCR儀

熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:醫(yī)學(xué)檢測(cè)病原體檢測(cè):可快速準(zhǔn)確地檢測(cè)血液、體液或組織樣本中的病原體 DNA 或 RNA,如乙肝病毒、丙肝病毒、病毒、等,為性疾病的早期診斷和防控提供有力支持。遺傳病診斷:檢測(cè)與遺傳性疾病相關(guān)基因的突變,輔助臨床診斷和遺傳咨詢(xún),如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等疾病的基因檢測(cè)。食品安全:致病菌檢測(cè):檢測(cè)食品中的沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌,確保食品安全。轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè):對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行定性和定量分析,保障消費(fèi)者的知情權(quán)和選擇權(quán)。無(wú)錫YELLOW熒光定量PCR儀