科研高靈敏多色熒光成像細(xì)胞計(jì)數(shù)儀功能

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-12-07

工作原理:通?;趫D像分析技術(shù),通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞懸液樣本進(jìn)行拍照,然后利用機(jī)器學(xué)習(xí)或人工智能算法對(duì)圖像中的細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別和計(jì)數(shù)。部分儀器還可結(jié)合熒光染色技術(shù),對(duì)特定標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)和分析。特點(diǎn):準(zhǔn)確性高:采用先進(jìn)的算法和光學(xué)系統(tǒng),能精確識(shí)別細(xì)胞,減少人為計(jì)數(shù)誤差,如賽默飛 Countess 3 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀利用機(jī)器學(xué)習(xí)算法,可準(zhǔn)確計(jì)數(shù)成團(tuán)細(xì)胞并忽略碎片。自動(dòng)化程度高:具備自動(dòng)聚焦、自動(dòng)調(diào)節(jié)光強(qiáng)度、自動(dòng)上樣等功能,只需將樣品準(zhǔn)備好放入儀器,即可快速得出計(jì)數(shù)結(jié)果,無(wú)需繁瑣的手動(dòng)操作。速度快:可在短時(shí)間內(nèi)完成細(xì)胞計(jì)數(shù),如 CCEasy 全自動(dòng)高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)分析儀能在 1 分鐘內(nèi)完成單個(gè)樣品的制備及檢測(cè)。功能多樣:除了基本的細(xì)胞計(jì)數(shù),還能進(jìn)行活細(xì)胞與死細(xì)胞區(qū)分、細(xì)胞活力分析、細(xì)胞大小測(cè)量、細(xì)胞形態(tài)分析等,部分儀器支持多通道熒光檢測(cè),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。數(shù)據(jù)管理方便:可自動(dòng)保存數(shù)據(jù),并支持多種格式輸出,還能通過(guò)網(wǎng)絡(luò)將數(shù)據(jù)傳輸?shù)诫娔X或云端,便于數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)、分析和共享。血液、組織勻漿等復(fù)雜樣本:選擇帶雜質(zhì)過(guò)濾功能的計(jì)數(shù)儀(如配備熒光通道排除細(xì)胞碎片);科研高靈敏多色熒光成像細(xì)胞計(jì)數(shù)儀功能

科研高靈敏多色熒光成像細(xì)胞計(jì)數(shù)儀功能,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

手工計(jì)數(shù)(血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法)是傳統(tǒng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)基準(zhǔn),可直接驗(yàn)證自動(dòng)計(jì)數(shù)儀的準(zhǔn)確性。操作步驟:取同一份細(xì)胞懸液,按自動(dòng)計(jì)數(shù)儀標(biāo)準(zhǔn)流程計(jì)數(shù)(重復(fù) 3 次,取平均值)。同時(shí)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板手工計(jì)數(shù):取 10μL 細(xì)胞懸液(或染色后的混合液)滴加至計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室,顯微鏡下計(jì)數(shù) 4 個(gè)角 + 中心共 5 個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)。計(jì)算濃度:濃度(個(gè) /mL)=(5 個(gè)方格總細(xì)胞數(shù) ÷5)×10?× 稀釋倍數(shù)。比較兩種方法的結(jié)果:若偏差在10%-15% 以?xún)?nèi),說(shuō)明自動(dòng)計(jì)數(shù)儀準(zhǔn)確性可接受;若偏差過(guò)大(如 > 20%),需排查自動(dòng)計(jì)數(shù)儀的參數(shù)設(shè)置(如細(xì)胞大小閾值、是否排除團(tuán)塊)或手工計(jì)數(shù)是否有誤(如漏數(shù)、計(jì)數(shù)區(qū)域錯(cuò)誤)??蒲蠧ountstar細(xì)胞計(jì)數(shù)儀直銷(xiāo)價(jià)藥物毒性評(píng)估:通過(guò)活性率變化判斷藥物對(duì)細(xì)胞的殺傷作用(如化療藥物 IC50 測(cè)定)。

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樣本制備關(guān)鍵細(xì)胞懸液均勻性:細(xì)胞團(tuán)會(huì)導(dǎo)致計(jì)數(shù)偏高(算法可能將團(tuán)塊誤判為單個(gè)細(xì)胞),需充分吹打或過(guò)濾(用 40-70μm 細(xì)胞篩)。染色時(shí)間:臺(tái)盼藍(lán)染色超過(guò) 5 分鐘可能導(dǎo)致活細(xì)胞被染色,影響活率計(jì)算,需嚴(yán)格控制時(shí)間。濃度適配:濃度過(guò)低(<1×10?個(gè) /mL)會(huì)導(dǎo)致計(jì)數(shù)誤差大,可減少稀釋倍數(shù);濃度過(guò)高(>1×10?個(gè) /mL)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞重疊,需增加稀釋倍數(shù)。2. 儀器與耗材維護(hù)計(jì)數(shù)板清潔:重復(fù)使用的計(jì)數(shù)板需用無(wú)水乙醇或 75% 酒精擦拭,避免殘留細(xì)胞或染料影響下次計(jì)數(shù);禁止用硬物刮擦計(jì)數(shù)池。鏡頭保護(hù):若圖像模糊,用鏡頭紙輕輕擦拭鏡頭,勿用酒精或其他試劑。定期校準(zhǔn):按儀器說(shuō)明書(shū)定期校準(zhǔn)(如用標(biāo)準(zhǔn)微球溶液),確保計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。3. 結(jié)果驗(yàn)證若對(duì)結(jié)果存疑,可通過(guò)顯微鏡手動(dòng)計(jì)數(shù)(血細(xì)胞計(jì)數(shù)板)進(jìn)行比對(duì)。同一樣本多次計(jì)數(shù)(3 次以上),取平均值以減少誤差。

上樣與計(jì)數(shù)操作1. 上樣用 10μL 移液器吸取染色后的混合液,緩慢滴加到計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中(避免產(chǎn)生氣泡,若有氣泡需重新上樣)。確保液體充滿計(jì)數(shù)池但不溢出(計(jì)數(shù)池容量通常為 10μL 左右,具體看耗材規(guī)格),放置 1-2 分鐘讓細(xì)胞沉降。2. 儀器計(jì)數(shù)將計(jì)數(shù)板放入儀器的樣品槽,調(diào)整位置使鏡頭對(duì)準(zhǔn)計(jì)數(shù)池。打開(kāi)計(jì)數(shù)軟件,選擇參數(shù):細(xì)胞類(lèi)型(如 “動(dòng)物細(xì)胞”“酵母”,儀器會(huì)根據(jù)大小閾值識(shí)別);稀釋倍數(shù)(輸入之前的稀釋比例,如 2 倍);計(jì)數(shù)區(qū)域(部分儀器可選擇全視野或特定區(qū)域)。點(diǎn)擊 “計(jì)數(shù)” 按鈕,儀器自動(dòng)拍攝圖像并分析:識(shí)別活細(xì)胞(透明、形態(tài)完整)和死細(xì)胞(藍(lán)色),排除雜質(zhì)和細(xì)胞團(tuán)。30 秒內(nèi)生成結(jié)果:細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、活細(xì)胞率(活細(xì)胞數(shù) / 總細(xì)胞數(shù) ×100%)、濃度(個(gè) /μL 或個(gè) /mL)。全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是常用設(shè)備,可對(duì)血液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板進(jìn)行快速準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)和分類(lèi)。

科研高靈敏多色熒光成像細(xì)胞計(jì)數(shù)儀功能,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

數(shù)據(jù)記錄與驗(yàn)證保存計(jì)數(shù)結(jié)果(支持 Excel 或 PDF 導(dǎo)出),記錄關(guān)鍵參數(shù):濃度、活率、稀釋倍數(shù)。重復(fù)計(jì)數(shù):同一樣本建議計(jì)數(shù) 3 次,取平均值(減少隨機(jī)誤差)。結(jié)果異常處理:若多次計(jì)數(shù)差異大,需檢查細(xì)胞懸液是否混勻,或重新制備樣本。實(shí)驗(yàn)后處理一次性計(jì)數(shù)板直接按生物廢棄物處理;可重復(fù)計(jì)數(shù)板用 75% 酒精沖洗后晾干,避光保存。關(guān)閉儀器電源,清理臺(tái)面,染液回收至廢液桶。關(guān)鍵提示細(xì)胞均勻性:吹打細(xì)胞時(shí)動(dòng)作輕柔,避免產(chǎn)生氣泡或損傷細(xì)胞。染色時(shí)間:臺(tái)盼藍(lán)染色超過(guò) 5 分鐘會(huì)導(dǎo)致活細(xì)胞著色,務(wù)必嚴(yán)格控制。濃度適配:若細(xì)胞濃度低于 1×10?個(gè) /mL,建議離心濃縮后再計(jì)數(shù)(避免誤差過(guò)大)。如使用臺(tái)盼藍(lán)染色,可區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,活細(xì)胞不著色,死細(xì)胞被染成藍(lán)色。蘇州高速自動(dòng)化系統(tǒng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀微量檢測(cè)

干細(xì)胞分化監(jiān)測(cè):區(qū)分未分化干細(xì)胞(圓形、尺寸均一)與分化后細(xì)胞(形態(tài)多樣、尺寸差異大)??蒲懈哽`敏多色熒光成像細(xì)胞計(jì)數(shù)儀功能

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的檢測(cè)精度因儀器型號(hào)和技術(shù)原理而異,通常其變異系數(shù)(CV值)可低至5%左右,計(jì)數(shù)準(zhǔn)確率能達(dá)到95%以上。具體如下:基于圖像分析技術(shù)的計(jì)數(shù)儀:如賽默飛Countess3FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,利用機(jī)器學(xué)習(xí)算法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別和計(jì)數(shù),可清晰地識(shí)別成團(tuán)細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞邊界并忽略碎片,其計(jì)數(shù)結(jié)果的誤差范圍小于手動(dòng)計(jì)數(shù)。莫納生物AutoCell全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用智能圖像識(shí)別分析算法,每個(gè)樣品采樣5個(gè)視野并自動(dòng)計(jì)算平均值,計(jì)數(shù)結(jié)果擬合R2值大于0.999。基于庫(kù)爾特原理的計(jì)數(shù)儀:如OrfloMoxiZ全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,結(jié)合庫(kù)爾特原理和**薄膜傳感器技術(shù),可對(duì)多種細(xì)胞類(lèi)型進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)準(zhǔn)確率高于95%,并且能在8秒內(nèi)完成計(jì)數(shù)。科研高靈敏多色熒光成像細(xì)胞計(jì)數(shù)儀功能