武漢正規(guī)外泌體提取試劑單價

來源: 發(fā)布時間:2025-11-15

所有的細胞都能分泌外泌體,但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,調(diào)控細胞生理活動。同時,外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細胞轉(zhuǎn)化、促進一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些?lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果,涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。武漢正規(guī)外泌體提取試劑單價

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外泌體鑒定:外泌體分離之后,需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物,多角度進行鑒定。l透射電鏡鑒定法:簡稱TEM,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法:簡稱NTA,該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快,檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標志物檢測:外泌體標志蛋白包括四跨膜蛋白家族,如CD9、CD63和CD81;細胞質(zhì)蛋白,如肌動蛋白(Actin)和鈣磷脂結(jié)合蛋白(Annexins);使用可截留100KD分子量的膜,通過離心截留上清中的外泌體,截留完成后。重慶正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹用于外泌體提取的體液收集注意事項:抽血技巧。

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外泌體的提取分離:1、超速離心法(差速離心)。超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行(如圖所示),可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,但過程比較費時,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑;此外,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時。

外泌體因諾貝爾醫(yī)學(xué)獎而被眾人知曉,也因其作為生命信息傳遞者,在體液中普遍存在及易獲得性等特點被譽為液體活檢"新貴",成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點,尤其是在一些病癥研究領(lǐng)域[。外泌體作為細胞間通信載體的作用現(xiàn)在已被普遍接受。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA,RNA,蛋白質(zhì)和其它分析物,研究表明,外泌體中的運轉(zhuǎn)RNA和蛋白質(zhì)與一些病癥的生長密切相關(guān),有望作為診斷標志物。研究發(fā)現(xiàn)Vps4A是一個外泌體的重要調(diào)控因子,與肝病的發(fā)生有著密切的關(guān)系,Vps4A基因的表達下調(diào)肝病的發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān)。通過microRNA高通量測序發(fā)現(xiàn)Vps4A基因能導(dǎo)致外泌體分泌肝病相關(guān)的重要microRNA,與肝病的發(fā)生密切相關(guān)。外泌體提?。壕哂懈哒扯鹊纳飿悠?。

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外泌體的提取方法:1.超速離心法(差速離心)。超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,但過程比較費時,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑;此外,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時,對離心時間極為敏感。外泌體的提取方法:超速離心法(差速離心)。重慶正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體的提取、分離方法:聚合物沉淀法。武漢正規(guī)外泌體提取試劑單價

外泌體的提取分離:1、PEG-base沉淀法。聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。2、試劑盒提取。近幾年來,市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,有的是通過特殊設(shè)計的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,提取效率和純化效果逐漸提高,因而逐漸取代超速離心法并推廣開來。有些試劑盒操作簡便,不用超速離心,同時可獲得高純度和高回收率的外泌體。武漢正規(guī)外泌體提取試劑單價