北京非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測結(jié)果判定

來源： 發(fā)布時(shí)間：2025-11-24

湖州申科針對(duì) LER 提供多平臺(tái)內(nèi)毒素檢測解決方案，適配不同成因的 LER 問題：一是鱟試劑配套增強(qiáng)劑，通過添加分散劑、過量二價(jià)陽離子，改善 LPS 聚集體狀態(tài)，提升回收率；二是重組鱟試劑（rCR），無 G 因子干擾，完全模擬天然鱟級(jí)聯(lián)反應(yīng)，靈敏度達(dá) 0.005EU/mL，易與天然方法橋接；三是重組 C 因子（rFC），靈敏度 0.005-5EU/mL，性狀穩(wěn)定，適配特定基質(zhì)；四是 單核細(xì)胞活化反應(yīng)測定（MAT)法，通過檢測 IL-6 覆蓋全熱原，不受 LPS 結(jié)構(gòu)變化影響；五是質(zhì)譜技術(shù)，驗(yàn)證基質(zhì)殘留對(duì)檢測的干擾。多平臺(tái)協(xié)同確保內(nèi)毒素檢測準(zhǔn)確可靠。
鱟試劑含多種酶和輔助因子，批次間活性差異可能導(dǎo)致內(nèi)毒素檢測結(jié)果變異性。北京非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測結(jié)果判定

北京非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測結(jié)果判定,內(nèi)毒素檢測

內(nèi)毒素檢測中，樣品中的蛋白質(zhì)或酶的修飾作用易破壞鱟試劑的反應(yīng)體系，導(dǎo)致檢測結(jié)果失真。鱟試劑檢測內(nèi)毒素的本質(zhì)是一系列絲氨酸蛋白酶的酶促放大過程，若樣品中存在氧化劑、抗氧化劑、蛋白水解劑或?qū)Ｒ皇Щ顒?，?huì)直接滅活反應(yīng)所需的酶；而乙醇、苯酚等物質(zhì)則會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，同樣抑制反應(yīng)進(jìn)程。例如，某些生物制品中含有的蛋白水解酶，可能提前降解鱟試劑中的蛋白酶，使內(nèi)毒素?zé)o法被正常檢測。為消除這類干擾，需優(yōu)先限制樣品中抑制物的含量：可采用內(nèi)毒素檢查用水稀釋樣品，降低抑制物濃度；對(duì)耐熱的抑制物（如部分蛋白水解酶），可通過加熱滅活處理（如 56℃孵育 30 分鐘）破壞其活性；若樣品基質(zhì)復(fù)雜，還可使用超濾技術(shù)分離內(nèi)毒素與干擾蛋白質(zhì)，避免修飾作用對(duì)酶促反應(yīng)的影響，保障內(nèi)毒素檢測結(jié)果的可靠性。
江蘇非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測進(jìn)行重組級(jí)聯(lián)試劑時(shí)，不同酶標(biāo)儀檢測樣本 Onset time 有差異，因信號(hào)采集方式和靈敏度不同。

北京非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測結(jié)果判定,內(nèi)毒素檢測

內(nèi)毒素檢測鱟試劑的反應(yīng)受pH的干擾。在進(jìn)行檢測時(shí)，要調(diào)節(jié)被測溶液的pH值，使鱟試劑與供試品溶液的混合溶液pH值落在鱟試劑指定的使用pH范圍內(nèi)（一般鱟試劑作用pH值在6.0~8.0范圍內(nèi))。用于調(diào)節(jié)pH值的試液或溶液（酸或堿)，可采用BET用水配制，并將溶液在無熱原容器中儲(chǔ)存；必須對(duì)試液或溶液進(jìn)行驗(yàn)證，以證明不含可檢出的內(nèi)毒素并且無干擾因素。調(diào)節(jié)pH試劑（酸或堿）的添加量，不應(yīng)該超過供試品的1092。如果超過10%，則在進(jìn)行計(jì)算時(shí)，將DH試劑的添加量的系數(shù)計(jì)算進(jìn)去。

重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）通過完整模擬天然鱟試劑的酶促級(jí)聯(lián)反應(yīng)路徑，實(shí)現(xiàn)高效且特異的內(nèi)毒素檢測。其反應(yīng)機(jī)制為：內(nèi)毒素首先活化重組 C 因子，活化的 C 因子進(jìn)一步活化重組 B 因子，隨后活化重組凝固酶原轉(zhuǎn)化為凝固酶，再催化顯色底物產(chǎn)生黃色信號(hào)（405nm 波長可檢測）。這一級(jí)聯(lián)放大過程有效提升了檢測靈敏度，即使微量內(nèi)毒素也能產(chǎn)生可識(shí)別信號(hào)。與單因子的重組 C 因子法（rFC）相比，rCR 的多因子級(jí)聯(lián)反應(yīng)抗干擾能力更強(qiáng)，尤其對(duì)復(fù)雜基質(zhì)樣品（如高蛋白單抗、疫苗）表現(xiàn)更優(yōu)。同時(shí)，rCR 剔除了天然鱟試劑中的 G 因子，避免了與 β-D 葡聚糖的非特異性反應(yīng)，從根本上減少假陽性結(jié)果，保障檢測數(shù)據(jù)的可靠性。
湖州申科生物提供重組級(jí)聯(lián)方法的技術(shù)轉(zhuǎn)移服務(wù)，含方法驗(yàn)證報(bào)告，助力內(nèi)毒素檢測方法平穩(wěn)切換。

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重組試劑（rCR、rFC）是解決 LER 的重要工具，優(yōu)化內(nèi)毒素檢測性能。重組鱟試劑（rCR）通過基因工程表達(dá) C、B 因子及凝固酶原，剔除 G 因子，完全模擬天然鱟級(jí)聯(lián)反應(yīng)，靈敏度達(dá) 0.005EU/mL，與天然方法橋接容易，能避免 LPS 結(jié)構(gòu)變化導(dǎo)致的假陰性；重組 C 因子（rFC）靈敏度 0.005-5EU/mL，性狀穩(wěn)定、均一性好，雖需熒光酶標(biāo)儀，但對(duì)部分 LER 場景（如無蛋白質(zhì)干擾）適配性強(qiáng)。二者擺脫了天然鱟試劑的局限，為內(nèi)毒素檢測提供更抗 LER 的選擇，契合行業(yè)技術(shù)趨勢。
內(nèi)毒素檢測假陰性多因樣品抑制，梯度稀釋結(jié)合加標(biāo)試驗(yàn)可定位偏差原因。浙江非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測抗干擾方案

重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）適用于細(xì)胞培養(yǎng)輔料、單抗、凍干疫苗等樣本，內(nèi)毒素檢測適用范圍廣。北京非動(dòng)物源內(nèi)毒素檢測結(jié)果判定

湖州申科生物凝膠法鱟試劑是根據(jù)凝集反應(yīng)所形成凝膠的堅(jiān)實(shí)程度來限量檢測樣本中細(xì)菌內(nèi)毒素含量。常用于人用和動(dòng)物用注射藥物、生物制品及醫(yī)療器械等領(lǐng)域中定性或半定量地測定細(xì)菌內(nèi)毒素含量。本品為海洋生物鱟的血液變形細(xì)胞溶胞物的冷凍干燥制品,內(nèi)含能被微量細(xì)菌內(nèi)毒素活化的凝固酶原(Proclotting enzyme)和凝固酶蛋白(Coagulogen)。在適宜的條件下(溫度、pH值及無干擾物質(zhì)),細(xì)菌內(nèi)毒素能活化鱟試劑中的凝固酶原,使備試劑產(chǎn)生凝集反應(yīng)形成凝膠。本品可以快速、準(zhǔn)確地檢測樣品中的內(nèi)毒素水平，提高實(shí)驗(yàn)效率,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
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